水蛭地龍?zhí)崛∫捍倮w溶腦保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、 第一部分通過腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞( BMEC)細(xì)胞培養(yǎng)為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停瑥捏w外直接觀察水蛭地龍?zhí)崛∫耗芊窦せ顑?nèi)源性纖溶系統(tǒng)，即能否促進(jìn)培養(yǎng)的BMEC分泌組織型纖溶酶原激活物( t-PA)，同時增加其活性，及對纖溶酶原激活劑抑制物-1(PAI-1)分泌及其活性的影響。從而揭示該制劑對缺血性腦血管疾病的作用機(jī)制。體外實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)水蛭地龍?zhí)崛∫嚎纱龠M(jìn)BMEC分泌t-PA、增加其活性、增強(qiáng)mRNA轉(zhuǎn)錄，表明水蛭地龍?zhí)崛∫嚎纱龠M(jìn)纖溶系統(tǒng)功能活躍，而

2、不影響抗纖溶系統(tǒng)穩(wěn)定狀態(tài)。第二部分從細(xì)胞水平，觀察水蛭地龍?zhí)崛∫阂种迫毖跽T導(dǎo)大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞壞死和調(diào)亡的作用，為臨床治療缺血性腦血管疾病提供更多的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：制備體外培養(yǎng)鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞缺氧模型，觀察正常和缺氧神經(jīng)細(xì)胞生長情況、反映細(xì)胞損害經(jīng)典指標(biāo)乳酸脫氫酶(LDH)釋放率的測定及用Annexin V-PI雙染色法流式細(xì)胞儀進(jìn)行壞死、凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)等。結(jié)論：N2添加劑可抑制膠質(zhì)細(xì)胞但促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞生長，從而純化神經(jīng)細(xì)胞；缺氧引起細(xì)胞損