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1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文高壓氧對新生缺氧缺血性腦損傷大鼠的影響姓名:劉美娜申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):兒科學(xué)新生兒指導(dǎo)教師:莊思齊20040602高壓氧對新生缺瓤缺血性腦損傷大置的影響中文攮要次,間隔24hX5次)。所有動物于21日齡斷奶,雌雄分籠喂養(yǎng)至42日齡。二、標(biāo)本處理和檢測指標(biāo)1體重監(jiān)鍘于實(shí)驗(yàn)前、缺氧缺血后24h、72h、1周、2周和5周即7日齡、8日齡、i0日齡、2周齡、3周齡和6周齡各稱體重t次(精碲到lg。2神經(jīng)行為的測評缺氧缺血
2、后2448h,記錄每只乳鼠有無早期神經(jīng)行為的異常并計(jì)算神經(jīng)行為異常發(fā)生率(=行為異常動物數(shù)/每組總觀察動物數(shù)100%):于3741日齡時(shí)通過Morris水迷宮(waterrflazc)系統(tǒng)測試大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力,以逃逸潛伏期、平臺象限游泳時(shí)間、游泳距離和平均游泳速度評價(jià)大鼠的遠(yuǎn)期神經(jīng)行為功能。3腦形態(tài)組織學(xué)測評大鼠42日齡時(shí)在10%水合氯醛(300mg/Kg)深度麻醉下,經(jīng)心臟至升主動脈依次灌注PBS和4%多聚甲醛液,固定腦組織后取
3、全腦標(biāo)本,記錄其大體形態(tài)并計(jì)算腦病變率(=損傷腦標(biāo)本數(shù)目/觀察組腦標(biāo)本總數(shù)x100%),其中37個(gè)腦標(biāo)本矢狀離斷為左右半球,分別稱重(精確到lmg),其余32個(gè)腦標(biāo)本取海馬組織塊作冠狀切片后分剮予HE染色(前囟后2833mm組織塊)、NADPHd染色和AchE纖維染色(均為前囟后33—43mm組織塊),經(jīng)光學(xué)顯微鏡觀察腦海馬的結(jié)構(gòu)變化并計(jì)數(shù)CAl區(qū)每mlTl長度錐體細(xì)胞層內(nèi)存活神經(jīng)元數(shù)和每蛐2范圍內(nèi)NOS神經(jīng)元數(shù),同時(shí)經(jīng)全自動圖象分析系
4、統(tǒng)記錄CAl區(qū)單位面積內(nèi)AchE陽性纖維面積百分?jǐn)?shù)。蘭、統(tǒng)計(jì)分折實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差(工s)表示,早期神經(jīng)行為異常發(fā)生率的比較用卡方檢驗(yàn),腦病變率比較用非參數(shù)KraskulWallis檢驗(yàn),水迷宮逃逸潛伏期的比較用重復(fù)測量數(shù)據(jù)方差分析和多重比較,左右半球腦重量的比較用配對t檢驗(yàn),其余數(shù)據(jù)多組之間比較采用單因素方差分析(ANOVA),兩兩之間進(jìn)一步比較用SNKq檢驗(yàn),n=O05為顯著性水準(zhǔn)。[結(jié)果]1體重增長情況實(shí)驗(yàn)前,各組大鼠的體重?zé)o差
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