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文檔簡介
1、1.研究高壓氧(HBO)對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)海馬區(qū)神經細胞凋亡及NF-KB表達的影響。2.初步探討HBO對缺氧缺血性腦損傷神經細胞的保護作用機制。3.觀察NF-KB的活化在抗神經細胞凋亡中的作用。 方法 新生7日齡Sprague-Dawley(sD)大鼠72只,體重12-19g。將動物按隨機表隨機分為三組:l、假手術組(24只):游離左側頸總動脈后不結扎,直接縫合皮下組織及皮膚,不進行缺氧處理;2、缺氧
2、缺血(HIBD)組(24只):建立HIBD模型3、高壓氧(HBO)組(24只):建立HIBD模型后,6h給予高壓氧治療一次,并在缺血缺氧后24h、48h、72h時各重復一次。假手術組、HIBD組和HBO組再分別于6h、24h、48h、72h各處死6只,灌注固定后取腦組織常規(guī)石臘包埋,切片,HE染色觀察神經細胞壞死,采用TUNEL方法檢測神經細胞凋亡,免疫組組織化學染色化法(SABC)檢測NF-KBp65在海馬區(qū)的表達。采用Image P
3、ro Plus5.0專業(yè)圖像分析軟件進行圖像分析,測量NF-KB p65表達陽性細胞數(shù)及凋亡陽性細胞數(shù)。用SPSS11.0統(tǒng)計分析軟件進行數(shù)據(jù)分析,P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。 結果 1.神經細胞凋亡情況:假手術組新生大鼠腦海馬區(qū)有少量凋亡細胞,各時間點之間無顯著差異(P>0.05);HIBD組凋亡細胞數(shù)在6h即增加明顯,24h繼續(xù)增加,48h達到高峰,72h開始有所減少,隨時間變化差異有統(tǒng)計學意義(P(0.05)
4、,與假手術組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05):HBO組6h凋亡細胞數(shù)比HIBD組6h減少,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),24h、48h、72h凋亡細胞數(shù)減少明顯,與HIBD組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),并且72h與假手術組相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。2.NF-κBp65的表達變化:假手術組NF-κBP65在海馬區(qū)有少量表達,各時間點無明顯變化(P>0.05);HIBD組NF-κB P65表達在6h后開始升高
5、,但與假手術組相比差異無統(tǒng)計學意義,24h、48h和72h增加明顯,隨時間變化差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),與假手術組相比有統(tǒng)計學意義(P<0.05);HBO組NF-κB P65表達增加更加明顯,在各時間點與HIBD組和假手術組差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 結論 1.高壓氧(HBO)可減少新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)的神經細胞凋亡,對神經系統(tǒng)具有保護作用。2.NF-κB的適度活化可能在抗神經細胞凋亡中
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