高壓氧對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷海馬區(qū)細(xì)胞凋亡及NF-κB表達(dá)的影響.pdf

1、1．研究高壓氧(HBO)對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡及NF-KB表達(dá)的影響。2．初步探討HBO對缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用機(jī)制。3．觀察NF-KB的活化在抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的作用。 方法 新生7日齡Sprague-Dawley(sD)大鼠72只，體重12-19g。將動(dòng)物按隨機(jī)表隨機(jī)分為三組：l、假手術(shù)組(24只)：游離左側(cè)頸總動(dòng)脈后不結(jié)扎，直接縫合皮下組織及皮膚，不進(jìn)行缺氧處理；2、缺氧

2、缺血(HIBD)組(24只)：建立HIBD模型3、高壓氧(HBO)組(24只)：建立HIBD模型后，6h給予高壓氧治療一次，并在缺血缺氧后24h、48h、72h時(shí)各重復(fù)一次。假手術(shù)組、HIBD組和HBO組再分別于6h、24h、48h、72h各處死6只，灌注固定后取腦組織常規(guī)石臘包埋，切片，HE染色觀察神經(jīng)細(xì)胞壞死，采用TUNEL方法檢測神經(jīng)細(xì)胞凋亡，免疫組組織化學(xué)染色化法(SABC)檢測NF-KBp65在海馬區(qū)的表達(dá)。采用Image P

3、ro Plus5.0專業(yè)圖像分析軟件進(jìn)行圖像分析，測量NF-KB p65表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)及凋亡陽性細(xì)胞數(shù)。用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果 1．神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況：假手術(shù)組新生大鼠腦海馬區(qū)有少量凋亡細(xì)胞，各時(shí)間點(diǎn)之間無顯著差異(P>0.05)；HIBD組凋亡細(xì)胞數(shù)在6h即增加明顯，24h繼續(xù)增加，48h達(dá)到高峰，72h開始有所減少，隨時(shí)間變化差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P(0.05)

4、，與假手術(shù)組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)：HBO組6h凋亡細(xì)胞數(shù)比HIBD組6h減少，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，24h、48h、72h凋亡細(xì)胞數(shù)減少明顯，與HIBD組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，并且72h與假手術(shù)組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2．NF-κBp65的表達(dá)變化：假手術(shù)組NF-κBP65在海馬區(qū)有少量表達(dá)，各時(shí)間點(diǎn)無明顯變化(P>0.05)；HIBD組NF-κB P65表達(dá)在6h后開始升高

5、，但與假手術(shù)組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，24h、48h和72h增加明顯，隨時(shí)間變化差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與假手術(shù)組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；HBO組NF-κB P65表達(dá)增加更加明顯，在各時(shí)間點(diǎn)與HIBD組和假手術(shù)組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論 1.高壓氧(HBO)可減少新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡，對神經(jīng)系統(tǒng)具有保護(hù)作用。2．NF-κB的適度活化可能在抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡中