苦皮藤內(nèi)生真菌A10殺菌活性成分研究.pdf

1、本論文以一株編號(hào)為A10的苦皮藤內(nèi)生真菌為出發(fā)菌株，研究了其代謝產(chǎn)物的農(nóng)用生物活性，對(duì)目標(biāo)活性物質(zhì)進(jìn)行分離和結(jié)構(gòu)解析，并對(duì)菌株進(jìn)行了初步的鑒定，觀(guān)察了添加物質(zhì)對(duì)代謝產(chǎn)物的影響。主要結(jié)果如下： 1.對(duì)A10代謝產(chǎn)物進(jìn)行了殺菌活性研究。生物測(cè)定結(jié)果表明，A10菌株發(fā)酵產(chǎn)物菌絲體的甲醇和乙酸乙酯提取物對(duì)多種病原真菌具有較強(qiáng)的殺菌活性。其中乙酸乙酯提取物的殺菌活性較甲醇好，在1000μg·mL-1濃度下對(duì)煙草赤星病菌、小麥根腐病菌、玉米

2、大斑病菌、番茄灰霉病菌、蘋(píng)果輪紋病菌的菌絲生長(zhǎng)抑制率均大于90％。盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明，A10菌株發(fā)酵產(chǎn)物菌絲體的乙酸乙酯提取物在2000μg·mL-1濃度下對(duì)小麥白粉病的治療和保護(hù)作用均在70％以上。 2.根據(jù)真菌的分類(lèi)及鑒定方法，用光學(xué)顯微鏡觀(guān)察A10菌株氣生菌絲、分生孢子、產(chǎn)孢細(xì)胞及菌落性狀，對(duì)比相關(guān)分類(lèi)系統(tǒng)，將A10菌株初步鑒定為卵形孢霉屬(Oosporawallr)。 3.采用常壓柱層析、HPLC制備等方法，在生物

3、活性追蹤指引下，從A10菌株代謝產(chǎn)物菌絲體提取物中分離出5個(gè)化合物QY01、QY02、QY03、QY04、QY05。經(jīng)波譜技術(shù)鑒定QY01、QY04、QY05分別為細(xì)胞松弛素D，麥角甾醇，衛(wèi)矛醇，QY02和QY03由于含量低于5mg未作進(jìn)一步的鑒定，但結(jié)合光譜分析，可斷定它們和QY01為同系物。在100μg·mL-1濃度時(shí)，QY01、QY02、QY03對(duì)煙草赤星病菌的活性比較高，達(dá)到50％以上。因此，我們可以初步推斷，A10菌株代謝產(chǎn)物

4、的抑菌活性主要是由這3個(gè)化合物貢獻(xiàn)的，其中以QY01的活性最高，它對(duì)煙草赤星病菌的EC50為35.01μg·mL-1。 4.比較溴化乙錠和2-氨基吡啶兩種添加物質(zhì)在不同的濃度下對(duì)A10菌株代謝產(chǎn)物的影響，結(jié)果表明，在添加物質(zhì)為溴化乙錠，添加濃度為0.4×10-6mg·mL-1時(shí)，A10菌株代謝的生物量和代謝產(chǎn)物細(xì)胞松弛素D均比未添加的原始培養(yǎng)液下的含量有明顯的增加，且隨著添加濃度的增大，含量均明顯上升。而添加2-氨基()的處理，