阿霉素-交聯(lián)葡聚糖磁性復(fù)合微粒的制備及其作為藥物載體的初步研究.pdf

1、磁導(dǎo)靶向給藥系統(tǒng)是目前靶向制劑研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)，在外加磁場(chǎng)作用下，超順磁性載藥微粒能夠有效集中于病變組織并釋放藥物，增強(qiáng)了藥物治療的靶向性，減小了因藥物全身性分布所造成的毒副作用。以葡聚糖為基質(zhì)的磁性復(fù)合微粒由于具有良好的生物相容性、低毒性及體內(nèi)可代謝性能，成為磁導(dǎo)靶向給藥的優(yōu)良磁性載體。 本研究以化學(xué)共沉淀得到的Fe3O4磁性納米顆粒為原料，先通過(guò)超聲分散的方法與葡聚糖反應(yīng)制得葡聚糖磁性復(fù)合微粒，再通過(guò)交聯(lián)聚合反應(yīng)制備交聯(lián)葡聚糖

2、磁性復(fù)合微粒。得到的交聯(lián)葡聚糖磁性復(fù)合微粒具有超順磁性，高的飽和磁化強(qiáng)度。并通過(guò)對(duì)磁性復(fù)合微粒的體外載釋藥能力，細(xì)胞毒性，載藥后對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用的研究，對(duì)交聯(lián)葡聚糖磁性復(fù)合微粒的緩釋性質(zhì)、生物相容性及載藥性能進(jìn)行了評(píng)價(jià)。具體工作內(nèi)容如下： 1.葡聚糖磁性復(fù)合微粒的制備方法優(yōu)化及表征：對(duì)超聲制備(以Fe3O4納米粒子為原料，加入葡聚糖在超聲處理?xiàng)l件下制備葡聚糖磁性復(fù)合微粒)和共沉淀(將二價(jià)和三價(jià)鐵鹽溶液與葡聚糖混合后，加入堿液

3、制備葡聚糖磁性復(fù)合微粒)的合成方法進(jìn)行比較，確定了超聲法作為制備葡聚糖磁性復(fù)合微粒優(yōu)選方法；并對(duì)超聲法中的葡聚糖與Fe3O4磁性納米顆粒質(zhì)量比、葡聚糖的分子量、NaOH濃度、反應(yīng)時(shí)間等條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明：葡聚糖與Fe3O4磁性納米顆粒質(zhì)量比為5：1、葡聚糖的分子量為40000、NaOH濃度為0.5 M、反應(yīng)4小時(shí)為最優(yōu)反應(yīng)條件，在該條件下制備得到了飽和磁化強(qiáng)度為6.78 emu/g，平均粒徑為130 nm的葡聚糖磁性復(fù)合微粒。

4、 2.交聯(lián)葡聚糖磁性復(fù)合微粒的制備方法優(yōu)化及表征：以環(huán)氧氯丙烷為交聯(lián)劑，將葡聚糖磁性復(fù)合微粒相互偶聯(lián)后制得交聯(lián)葡聚糖磁性復(fù)合微粒。對(duì)交聯(lián)反應(yīng)過(guò)程中NaOH濃度、交聯(lián)劑的用量、交聯(lián)劑的加入方式等條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明在1.5 MNaOH、分三批共加入3.6 mL經(jīng)異丙醇三倍稀釋的環(huán)氧氯丙烷、60℃條件下，攪拌反應(yīng)8h可得到優(yōu)選的交聯(lián)葡聚糖磁性復(fù)合微粒，其飽和磁化強(qiáng)度為48.2 emu/g，鐵含量為58.9％，粒徑分布范圍在1～3μm

5、的交聯(lián)葡聚糖磁性復(fù)合微粒。 3.阿霉素/交聯(lián)葡聚糖磁性復(fù)合微粒的制備方法及體外釋藥實(shí)驗(yàn)：以阿霉素為研究藥物，按不同阿霉素與交聯(lián)葡聚糖磁性復(fù)合微粒的質(zhì)量比，在37℃、180 rpm條件下，振蕩反應(yīng)96 h，制得阿霉素/交聯(lián)葡聚糖磁性復(fù)合微粒。通過(guò)計(jì)算載藥率與包封率可知，m阿霉素：m微粒為10％時(shí)為最佳投料比，該條件下制備的阿霉素/交聯(lián)葡聚糖磁性復(fù)合微粒的最佳載藥時(shí)間(即藥物載體附載DOX量達(dá)飽和狀態(tài)的時(shí)間)為72 h、載藥量為78

6、μg/mg、包封率為80.2％，符合國(guó)家藥典要求；體外釋藥實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該載藥磁性微粒在3h、1d、3d、5d、7d時(shí)阿霉素的累積釋藥率分別為34.4％、51.5％、66.5％、68.7％及69.4％。說(shuō)明交聯(lián)葡聚糖磁性微?？勺鳛樗幬镙d體應(yīng)用，且有一定的緩釋作用。 4.交聯(lián)葡聚糖磁性復(fù)合微粒細(xì)胞毒性及釋藥性能研究：以入源肝癌細(xì)胞系HepG2為研究對(duì)象，利用四唑鹽(MTT)法檢測(cè)交聯(lián)葡聚糖磁性復(fù)合微粒的細(xì)胞毒性，并對(duì)阿霉素/交聯(lián)葡