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文檔簡介
1、目的:探究S100A4在子宮內膜癌組織中的表達方式及其臨床意義;探索S100A4對子宮內膜癌HEC-1B細胞遷移、侵襲能力的影響及其可能的機制。
方法:采用免疫組織化學方法檢測正常子宮內膜、非典型增生及子宮內膜癌組織中S100A4的表達。運用脂質體lipofectamine2000將構建的4種S100A4-shRNA質粒轉入HEC-1B細胞,取轉染效率最高組細胞進行嘌呤霉素穩(wěn)定篩選及擴增培養(yǎng),獲得穩(wěn)定轉染細胞株;運用實時熒光定
2、量 PCR及免疫印跡(western-blot)方法檢測轉染前后S100A4、VEGF、MMP-2基因和蛋白的表達變化;運用體外劃痕實驗及Transwell小室法檢測轉染前后細胞遷移、侵襲能力的改變。
結果:1.S100A4在內膜癌組織腺上皮中的陽性表達率(32%)顯著高于正常內膜腺上皮(0%)(P<0.01),而其在子宮內膜癌與非典型增生腺上皮中的表達比較,差異無統(tǒng)計學意義;S100A4蛋白的腺上皮表達與腫瘤的病理分級及淋巴
3、結轉移密切相關(P<0.001);2.S100A4-shRNA可有效抑制 HEC-1B細胞 S100A4的表達,伴隨VEGF表達的下降(P<0.05),而MMP-2的表達無顯著差異;S100A4表達下調后,HEC-1B細胞體外遷移和侵襲能力也顯著下降(P<0.01)。
結論:S100A4在子宮內膜癌腺上皮中的表達率隨內膜癌組織的病理分級升高增加,在內膜癌患者的預后中可能有重要意義。S100A4表達下調可明顯抑制腫瘤細胞的遷移、
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