干擾Snail基因表達(dá)對子宮內(nèi)膜癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、本文分析了干擾Snail基因表達(dá)對子宮內(nèi)膜癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響。本研究分為兩個部分：
　　第一部分：Snail蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)與臨床意義。
　　目的：通過對Snail在子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)的研究來探索Snail與子宮內(nèi)膜癌浸潤和轉(zhuǎn)移及預(yù)后的關(guān)系。
　　方法：采用免疫組織化學(xué)方法，結(jié)合組織芯片技術(shù)，檢測124例子宮內(nèi)膜癌、28例不典型增生內(nèi)膜、35例正常內(nèi)膜組織中Snail的表達(dá)水平，分析Snail蛋白表達(dá)與臨床病理因素

2、的關(guān)系。
　　結(jié)果：子宮內(nèi)膜癌組織中Snail的表達(dá)率為46.8％，與不典型增生內(nèi)膜和正常內(nèi)膜組織相比，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。Snail表達(dá)與FIGO分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)(P<0.05)。Snail陽性患者生存期明顯短于陰性患者。
　　結(jié)論：Snail可能通過調(diào)控HIF-1α和E-cadherin的表達(dá)，在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生及侵襲轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用，針對干預(yù)Snail途徑的方案可能對于子宮內(nèi)膜癌的診治提供新

3、的方法。
　　第二部分：shRNA抑制Snail基因表達(dá)的作用。
　　目的：通過shRNA抑制轉(zhuǎn)錄因子Snail的表達(dá)，觀察人子宮內(nèi)膜癌ISK細(xì)胞在體外侵襲轉(zhuǎn)移能力以及和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)系。
　　方法：構(gòu)建表達(dá)Snail的短發(fā)夾RNA(Small hairpin-shaped RNA, shRNA)的RNA干擾載體(Snail shRNA vector)和表達(dá)不針對任何已知mRNA的shRNA陰性對照RNA干擾載體(

4、control shRNA vector)，分別轉(zhuǎn)染ISK細(xì)胞后篩選得到Snail表達(dá)受抑制的ISK-shSnail細(xì)胞和 Snail表達(dá)未受影響的ISK-shControl細(xì)胞。分別采用 RT-PCR和 Western blot技術(shù)在mRNA和蛋白水平驗(yàn)證各組細(xì)胞。用CCK-8檢測各組細(xì)胞的增殖能力。用Transwell小室模型結(jié)合基質(zhì)膠的方法比較各組細(xì)胞在遷移能力和侵襲能力的差異。
　　結(jié)果：Snail-shRNA組與 ISK

5、未轉(zhuǎn)染組相比,Snail表達(dá)明顯減弱(P<0.01), Transwell chamber穿膜細(xì)胞數(shù)顯著減少(P<0.01); ISK-shControl組 Snail表達(dá)及Transwell chamber穿膜細(xì)胞數(shù)和ISK未轉(zhuǎn)染組相比無顯著差異(P>0.05)。CCK-8法檢測細(xì)胞生長，Snail干擾后ISK細(xì)胞生長明顯減慢,與未轉(zhuǎn)染組相比有顯著差異。
　　結(jié)論：通過RNA干擾沉默Snail基因的表達(dá)能有效地抑制子宮內(nèi)膜癌IS