基于超順磁氧化鐵的新型多功能納米平臺(tái)的設(shè)計(jì)合成及其在腫瘤靶向成像和治療中的研究.pdf

1、目的：構(gòu)建超順磁性氧化鐵藥物運(yùn)載納米顆粒，設(shè)計(jì)腫瘤TEM8受體靶向性多肽，以及合成靶向TEM8的磁性-光學(xué)雙功能成像探針，探討其應(yīng)用于多種腫瘤細(xì)胞及移植瘤的靶向成像可行性及治療效果。
　　 方法：
　　 ①將Dox及多巴胺修飾的INPs共同裝載于HSA基質(zhì)中制備水溶性D-HINPs。通過TEM，DLS，釋放實(shí)驗(yàn)研究其表征及穩(wěn)定性。MTT法檢測(cè)細(xì)胞毒性。細(xì)胞熒光染色反映D-HINPs的內(nèi)化。經(jīng)尾靜脈注射Dox，D-HINP

2、s，Doxil至4T1荷瘤裸鼠體內(nèi)，研究Dox的生物分布及血液循環(huán)半衰期。在體MR成像及組織芡光染色確認(rèn)HINP靶向運(yùn)輸作用。Dox，D-HINPs，Doxil及對(duì)照組PBS、HINPs治療4T1荷瘤裸鼠，記錄腫瘤體積及體重，評(píng)價(jià)療效；
　　 ②由炭疽桿菌毒素的PA的結(jié)構(gòu)域IV中的小環(huán)結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)合成13肽，KYNDRLPLYISNP(QQM)，并將isF標(biāo)記QQM用于檢測(cè)UM-SCCI頭頸癌及MDA-MB-435黑色素瘤細(xì)胞及移植

3、瘤內(nèi)TEM8表達(dá)水平；
　　 ③以IONP為核心通過共價(jià)鍵連接ZW-800及QQM多肽。通過TEM，DLS，F(xiàn)L及UV-ris檢測(cè)研究表征，MTT檢測(cè)細(xì)胞活力。4T1細(xì)胞及移植瘤雙功能成像及形態(tài)學(xué)檢測(cè)細(xì)胞標(biāo)記率及體內(nèi)腫瘤攝取、分布。
　　 結(jié)果：
　　 ①D-NIHPs粒徑約50.8nm。HINPs無明顯毒性，D-NIHPs細(xì)胞生長(zhǎng)抑制依賴Dox濃度，其內(nèi)的Dox可于細(xì)胞標(biāo)記約5min即內(nèi)化至細(xì)胞核內(nèi)發(fā)揮作用。D

4、-HINPs組可持續(xù)抑制腫瘤生長(zhǎng)，至治療終末腫瘤體積增長(zhǎng)395％，Doxil組約349%，Dox組979%。Doxil(2.0±0.3%)及D-HINPs(8.9±1.2%)組顯示少量的體重減輕；
　　 ②ELISA顯示QQM特異性結(jié)合至TEM8胞外段vWA域，IC50=304nM。lSF-FP-QQM在TEM8高表達(dá)的UM-SCC1移植瘤中的攝取率高于TEM8低表達(dá)的MDA-MB-435移植瘤，相應(yīng)lh PET成像及UM-SC

5、CI瘤lh阻斷成像的腫瘤攝取分別為2.96+0.84，1.38+0.56，及1.12+1.01%ID/g:
　　 ③ZIO-Q粒徑約為47.8nm，無明顯毒性，體內(nèi)MR成像各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均顯示高于ZIO的腫瘤負(fù)性增強(qiáng)，光學(xué)成像中熒光信號(hào)強(qiáng)度也高于ZlO組，這種效應(yīng)均可在2h阻斷成像中被阻抑。
　　 結(jié)論：
　　 ①成功將HINP轉(zhuǎn)化成具有腫瘤靶向，活體成像及治療功能的納米平臺(tái)。D-HINPs能顯著抑制4T1移植瘤生長(zhǎng)