兩面針中木脂素化合物結(jié)晶-8的鎮(zhèn)痛作用及機(jī)制的研究.pdf

1、研究目的： 探討兩面針木脂素化合物結(jié)晶-8的鎮(zhèn)痛作用；觀察側(cè)腦室注射結(jié)晶-8對(duì)大鼠痛閥的影響，同時(shí)了解結(jié)晶-8的鎮(zhèn)痛作用與阿片受體及其單胺類遞質(zhì)的關(guān)系，并觀察氟哌啶醇、東莨菪堿等對(duì)結(jié)晶-8鎮(zhèn)痛作用的影響；建立大鼠福爾馬林疼痛模型，研究結(jié)晶-8的鎮(zhèn)痛作用機(jī)制。 研究方法： 1.結(jié)晶-8的鎮(zhèn)痛作用采用小鼠醋酸扭體法、熱板法，觀察用藥后扭體反應(yīng)數(shù)，舔足后潛伏期；采用福爾馬林法觀察其I相和II相的疼痛反應(yīng)；通過(guò)小鼠輻射熱

2、刺激法觀察用藥后痛閥變化。 2.結(jié)晶-8的鎮(zhèn)痛機(jī)制的初步研究采用輻射熱刺激法，結(jié)晶-8側(cè)腦室注射后觀察大鼠痛閥變化；同時(shí)考察納絡(luò)酮、利血平、氟哌啶醇、東莨菪堿等對(duì)結(jié)晶-8鎮(zhèn)痛作用的影響。 3.結(jié)晶-8的鎮(zhèn)痛機(jī)制的研究 3.1福爾馬林疼痛模型的建立實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物在右后肢趾部皮下注射5％的福爾馬林100μl，參考Mestre的分級(jí)評(píng)分法，進(jìn)行模型的評(píng)估，合格動(dòng)物進(jìn)入下一步實(shí)驗(yàn)。HE染色和尼氏染色觀察模型組動(dòng)物病理改變，同

3、時(shí)透射電鏡觀察其超微結(jié)構(gòu)。 3.2結(jié)晶-8的鎮(zhèn)痛作用與中樞NO、PGE2、MDA關(guān)系疼痛大鼠腦組織中的NO、PGE2、MDA含量測(cè)定采用比色法。 3.3結(jié)晶-8鎮(zhèn)痛作用與中樞神經(jīng)遞質(zhì)的關(guān)系造模成功后的大鼠，ICV結(jié)晶-8后，采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定了腦組織勻漿中的NE、5-TH、DA的含量。 3.4結(jié)晶-8對(duì)中樞組織FOS的表達(dá)影響實(shí)驗(yàn)免疫組化觀察疼痛大鼠中樞FOS的表達(dá)情況。 3.5結(jié)晶-8對(duì)致痛大鼠腦內(nèi)β-

4、內(nèi)啡肽的影響海馬、下丘腦連續(xù)切片，免疫組化染色，對(duì)照?qǐng)D譜在顯微鏡下觀察β-內(nèi)啡肽在海馬、下丘腦的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1.結(jié)晶-8(15、30、60mg/kg)均可明顯減少小鼠的扭體反應(yīng)次數(shù)，延長(zhǎng)小鼠舔足后的潛伏期，對(duì)福爾馬林致痛動(dòng)物的I和II相疼痛反應(yīng)均有抑制作用，并延長(zhǎng)小鼠甩尾潛伏期。 2.結(jié)晶-8側(cè)腦室注射能提高大鼠痛閥；利血平能拮抗結(jié)晶-8鎮(zhèn)痛的作用；納絡(luò)酮、氟哌啶醇、東莨宕堿等未影響結(jié)晶-8的鎮(zhèn)痛作

5、用。 3.動(dòng)物注射福爾馬林以后，出現(xiàn)明顯的完整的兩期傷害性反應(yīng)；HE染色和尼氏染色未見其明顯的病理改變；超微電鏡顯示模型動(dòng)物海馬、下丘腦可見核周，胞漿線粒體腫脹等情況。 4.ICV結(jié)晶-8可以降低疼痛大鼠腦組織NO、PGE2、MDA含量。 5.結(jié)晶-8在中樞中能夠顯著升高疼痛大鼠的多巴胺，5-羥色胺的含量，降低去甲腎上腺素的含量。 6.結(jié)晶-8抑制疼痛大鼠中樞FOS的表達(dá)，與模型組相比具有顯著的差異(p<

6、0.01)。 7.結(jié)晶-8能提高海馬、下丘腦的β-內(nèi)啡肽陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)數(shù)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)論： 1.結(jié)晶-8有較顯著的鎮(zhèn)痛作用。 2.結(jié)晶-8鎮(zhèn)痛作用可能有中樞機(jī)制的參與，與單胺類遞質(zhì)有關(guān)；無(wú)阿片系統(tǒng)、M膽堿系統(tǒng)的介導(dǎo)參與，與抑制中樞DA系統(tǒng)無(wú)關(guān)。 3.結(jié)晶-8有中樞鎮(zhèn)痛機(jī)制，其機(jī)制可能與抑制腦組織中的PGE2合成，脂質(zhì)過(guò)氧化及NO的釋放有關(guān)。 4.結(jié)晶-8調(diào)整體內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量是其鎮(zhèn)痛的機(jī)理