氯化兩面針堿對(duì)裸鼠人肝癌移植瘤的抑制作用及其分子機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討氯化兩面針堿對(duì)人肝癌SMMC-7721荷瘤裸鼠的抑制作用，并探討其抗腫瘤的分子生物學(xué)機(jī)制。
　　方法：(1)選用人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721建立荷瘤裸鼠移植腫瘤模型，考察其體內(nèi)抗肝癌效應(yīng)。(2)應(yīng)用RT-PCR半定量檢測(cè)各組腫瘤組織中p53、p21、POLD1 mRNA的表達(dá)。(3)應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)各組腫瘤組織中p53、p21、p125蛋白的表達(dá)。(4)應(yīng)用RNAi干擾技術(shù)沉默p53基因，應(yīng)用RT-PCR半定量檢測(cè)各

2、組腫瘤組織中p21 mRNA的表達(dá)，應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)各組腫瘤組織中P21、p125蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：(1)氯化兩面針堿組瘤重低于生理鹽水組(p<0.05)；與生理鹽水組相比，氯化兩面針堿組裸小鼠精神好，體重增加慢，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；與生理鹽水組相比，而氯化兩面針堿組腫瘤生長(zhǎng)曲線較為低平，其抑瘤率為30.90％。(2)經(jīng)RT-PCR法測(cè)定，氯化兩面針堿組裸鼠移植瘤組織中p53、p21 mRNA的表達(dá)量均高于生

3、理鹽水組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；POLD1 mRNA的表達(dá)沒有明顯差異(P>0.05)。(3)經(jīng)免疫組化法測(cè)定，氯化兩面針堿組裸鼠移植瘤組織中P21的表達(dá)量高于生理鹽水組，P53、p125的表達(dá)量低于生理鹽水組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(4)p53i后，與氯化兩面針堿組相比，氯化兩面針堿作用下p21 mRNA及其蛋白表達(dá)下調(diào)，但與生理鹽水組相比仍上調(diào)；p53i后POLD1編碼蛋白p125表達(dá)水平上調(diào)；NC+p53i

4、組和p53i組腫瘤組織中p125蛋白表達(dá)較高，p125陽性表達(dá)率從高到低依次為為p53i組>NC+p53i組>NS組≈shNC組>NC組，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：氯化兩面針堿對(duì)人肝癌SMMC-7721荷瘤裸鼠移植瘤具有抑制作用，可能誘導(dǎo)p21通過p53依賴與非依賴途徑參與細(xì)胞周期阻滯，從而達(dá)到抑制腫瘤的作用；p53低表達(dá)能夠促進(jìn)POLD1的基因轉(zhuǎn)錄；氯化兩面針堿可能通過p53途徑抑制了參與DNA復(fù)制的主要