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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察腺病毒介導(dǎo)白細(xì)胞介素10(rIL-10)基因?qū)OD鼠1型糖尿病早期胰島β細(xì)胞的保護(hù)作用。
方法:復(fù)蘇并培養(yǎng)293細(xì)胞,并擴(kuò)增攜帶有白細(xì)胞介素10基因的腺病毒(Ad-rIL-10)和含有空載體的腺病毒(Ad-eGFP),4-5周齡的清潔級(jí)NOD小鼠(體重20-23g)46只,隨機(jī)分為:對(duì)照組:①空白對(duì)照組10只,②糖尿病對(duì)照組12只;實(shí)驗(yàn)組:③腹腔注射Ad-rIL-10組12只,④腹腔注射Ad-eGFP組12只。
2、①組不做任何處理,②-④組于自由喂養(yǎng)1周后第1、14天給予環(huán)磷酰胺200mg/kg腹腔注射促發(fā)糖尿病,成模后②不做任何處理,③給予腹腔注射含Ad-rIL-10的病毒液0.1ml,④給予腹腔注射含Ad-eGFP病毒液0.1ml。所有小鼠自由飲食,每周測(cè)定體重、血糖,成模3周后處死小鼠,立即取出胰腺,中性福爾馬林固定,石蠟包埋固定做病理切片HE染色及免疫組化觀察胰腺炎癥浸潤(rùn)程度和IL-10局部表達(dá)程度,留取小鼠血液標(biāo)本,離心取血清,測(cè)定血清
3、IFN-γ,IL-4,IL-10和C肽水平。
結(jié)果:①組與②、③、④組相比血糖水平及體重變化有明顯差異,但②、③、④組組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;胰腺切片蘇木素伊紅染色(HE染色)示②、③、④組組間胰島炎無(wú)明顯差異,免疫組化示③組rIL-10表達(dá)水平明顯高于①、②、④組;ELISA法測(cè)IFN-γ、IL-4、IL-10和C肽表達(dá)水平示②、③、④組組間無(wú)明顯差異。
結(jié)論:rIL-10基因?qū)OD鼠1型糖尿病早期胰島
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