缺氧對大鼠心肌細胞小凹蛋白-3和一氧化氮合酶表達的影響以及雌激素的作用.pdf

1、[目的]探討缺氧對心肌細胞小凹蛋白-3(caveolin-3)蛋白和mRNA、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA、誘導型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表達的影響,以及17β-雌二醇(E2)對缺氧心肌細胞的保護作用。
　　 [方法]Sprague-Dawley大鼠乳鼠(出生1～2d)心肌細胞原代培養(yǎng),待細胞狀態(tài)良好時進行藥物處理和缺氧干預。將細胞分為四組,分別為C1(對照)、C2(單純加藥)、H1(單純?nèi)毖?、H2(加藥缺氧

2、)共四組。即C2、H2經(jīng)17β-雌二醇作用24h,之后H1、H2缺氧(5％CO2+95％N2)12h,之后進行統(tǒng)一處理。采用MTT法檢測缺氧對心肌細胞活力和抑制率的影響以及17β-雌二醇對缺氧心肌細胞的保護作用。采用Western Blot技術(shù)檢測caveolin-3的表達變化。采用Real-Time PCR技術(shù)分析caveolin-3mRNA、eNOSmRNA以及iNOS mRNA水平的表達變化。
　　 [結(jié)果]缺氧使心肌細胞

3、活力下降,且對心肌細胞產(chǎn)生抑制,10-8、10-7mol/L17β-雌二醇可以提高細胞活力,逆轉(zhuǎn)缺氧對心肌細胞的抑制作用。缺氧使培養(yǎng)的心肌細胞caveolin-3蛋白、mRNA、iNOS mRNA的表達升高,eNOS mRNA的表達降低,而經(jīng)10-7mol/L17β-雌二醇預處理后的缺氧心肌細胞較單純?nèi)毖踅M心肌細胞caveolin-3蛋白和mRNA、iNOS mRNA表達降低,eNOS mRNA表達升高。
　　 [結(jié)論]缺氧對心