AQP1、VEGF在變應性鼻炎大鼠鼻黏膜中的表達及其相關性研究.pdf

1、研究目的：水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)是一類介導水、甘油、尿素等分子跨膜轉(zhuǎn)運的疏水性跨膜蛋白，廣泛分布于動、植物及微生物，迄今為止在哺乳動物體內(nèi)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了13個亞型，即AQP0-12[1]。AQP1表達于多種上皮組織和內(nèi)皮細胞。血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)是已知最強的血管通透因子[2]，其通透作用強于組胺1×106倍[3]，對血管生長具有強烈的誘導作用，可增

2、生形成微血管，同時可作用于血管內(nèi)皮細胞調(diào)節(jié)小血管和毛細血管的通透作用，這種作用使血漿及部分大分子物質(zhì)（如纖維蛋白原）滲到血管外基質(zhì)中致使組織發(fā)生水腫。研究發(fā)現(xiàn)，兩者的異常表達和調(diào)節(jié)失控與某些疾病的炎性、水腫有關系，但在變應性鼻炎（allergicthinitis，AR）中鮮有研究，且相關的變態(tài)反應機制尚不清楚。本實驗旨在通過對照AQP1和AEGF在AR大鼠、正常大鼠以及地塞米松干預后AR大鼠鼻黏膜中的表達水平和兩者的相關性，從而進一步探

3、討AQP1、AEGF在AR發(fā)病機制中的作用。
　　 研究方法：選取8周齡健康Wistar大鼠30只，雌雄各半，體重160g-200g。正常飼養(yǎng)一周后隨機分為三組，對照組，模型組和干預組，每組10只，以卵清蛋白(Ovalbumin，OVA)經(jīng)典致敏法制作模型組和干預組Wistar大鼠AR模型，對照組以生理鹽水代替OVA，干預組大鼠造模成功后腹腔注射地塞米松，干預一周，模型組以等量生理鹽水代替。用組織化學方法觀察變應性鼻炎的組織形態(tài)

4、學特征，運用免疫組織化學方法(SP法)和real-timePCR兩種方法分別測定各組鼻腔黏膜AQP1與VEGF的表達。實驗結(jié)果以-x±s表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件對三組數(shù)據(jù)進行分析，數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布且方差齊的進行方差分析及多組均數(shù)差別的多重比較（LSD法）。偏態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進行多組數(shù)據(jù)的Kruskal-Wallis檢驗及Bonferroni法兩兩比較平均秩和，AQP1與VEGF雙變量符合正態(tài)分布，二者之間的相關性采用Pe

5、arson分析，反之采用Spearman秩相關。以P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。
　　 研究結(jié)果：按行為學評分標準，模型組和干預組大鼠均被激發(fā)出典型的癥狀，示造模成功。干預組經(jīng)過地塞米松干預后，偶有流涕，噴嚏和撓鼻現(xiàn)象基本消失。造模成功后上皮杯狀細胞明顯增多，上皮下層組織水腫，炎性細胞浸潤及嗜酸性細胞明顯增多，腺體增生，小血管增加、充血。干預組組織水腫，血管擴張、腺體增生及炎性細胞浸潤程度均減輕。三組大鼠的癥狀學分析模型組評分高于

6、對照組和干預組。AQP1主要表達于大鼠鼻黏膜被覆上皮基底膜、血管內(nèi)皮細胞膜和腺體細胞內(nèi)，VEGF主要表達于小動、靜脈血管內(nèi)皮細胞和腺體細胞內(nèi)。AQP1與VEGF在模型組中經(jīng)免疫組織化學和real-timePCR法檢測均高表達，干預組表達低于模型組。差異均具有統(tǒng)計學意義，且兩者具有正相關性。
　　 結(jié)論：AQP1、VEGF在實驗性變應性鼻炎大鼠鼻粘膜的強表達，表明AQP1、VEGF參與了變應性鼻炎的發(fā)病過程，與組織的水腫、腺體的過