膽囊粘膜ABCG1基因表達(dá)和膽囊膽固醇息肉發(fā)病關(guān)系的研究.pdf

1、背景：膽囊膽固醇息肉是臨床常見(jiàn)病，可并發(fā)結(jié)石。膽固醇息肉脫落可致急性膽囊炎，甚至是胰腺炎的發(fā)作，某些高危因素下有惡變可能。膽囊膽固醇息肉其病變特征是膽囊壁大量膽固醇酯等脂質(zhì)堆積，通過(guò)對(duì)膽囊膽固醇息肉病變局部黏膜成分生化分析時(shí)發(fā)現(xiàn)，膽固醇酯的含量較對(duì)照組增高，可達(dá)12倍之多，而游離膽固醇沒(méi)有增加。推測(cè)膽囊粘膜膽固醇酯病理性增多有三種可能的來(lái)源：⑴膽囊粘膜局部合成膽固醇增多和或游離膽固醇酯化增多；⑵膽囊上皮細(xì)胞從血液或是膽汁中吸收膽固醇增多

2、；⑶膽囊粘膜膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)障礙。已有研究表明，膽囊膽固醇息肉患者膽囊粘膜中催化膽固醇酯化的?；o酶A 膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶（ACAT）活性明顯升高，而水解膽固醇酯為游離膽固醇的膽固醇酯水解酶(CEH)活性沒(méi)有變化，推測(cè)ACAT/CEH 比率升高是膽固醇息肉發(fā)病原因之一；此外膽固醇息肉患者膽汁成分多有膽固醇過(guò)飽和，膽汁膽固醇過(guò)飽和被認(rèn)為是膽固醇結(jié)石發(fā)病的病理生理基礎(chǔ)，其在膽固醇息肉發(fā)病中可能也有重要作用，有文獻(xiàn)報(bào)道隨著膽汁中膽固醇含量的升高，

3、膽囊上皮細(xì)胞吸收膽固醇也相應(yīng)升高，雖然其中大部分被重新分泌至膽囊腔，但殘余膽固醇量可能也高于生理水平，這進(jìn)一步使得ACAT 活性升高，從而膽固醇酯化增多，膽囊粘膜膽固醇酯堆積。膽囊粘膜吸收的膽固醇存在另一種代謝途徑，就是經(jīng)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)途徑，轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟進(jìn)行代謝，推測(cè)其在膽固醇息肉發(fā)病中存在一定作用。ABCG1 是三磷酸腺苷結(jié)合盒（ATP binding cassette,ABC）G 亞家族一員，主要功能是介導(dǎo)外周組織細(xì)胞中膽固醇外流至H

4、DL 并轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟進(jìn)行代謝，參與了膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)。體外實(shí)驗(yàn)中，乙?；腖DL 或是LXR 激動(dòng)劑可以促進(jìn)巨噬細(xì)胞膽固醇外流至HDL，而通過(guò)RNA 干擾使ABCG1 去表達(dá)，則外流至HDL的膽固醇明顯減少；通過(guò)cDNA 轉(zhuǎn)染促使ABCG1 在人胚腎細(xì)胞高表達(dá)7782，同樣支持ABCG1 可以介導(dǎo)膽固醇外流至HDL；體內(nèi)試驗(yàn)中，ABCG1 基因敲出小鼠外周組織中可見(jiàn)大量膽固醇及中性脂質(zhì)堆積?？梢?jiàn)ABCG1 在介導(dǎo)膽固醇外流至HDL 進(jìn)一步

5、轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟代謝的過(guò)程中發(fā)揮重要作用。但是目前尚無(wú)膽固醇息肉患者膽囊粘膜ABCG1 表達(dá)的相關(guān)性研究。
　　 目的：通過(guò)檢測(cè)膽囊粘膜ABCG1 基因及蛋白表達(dá)情況，為進(jìn)一步研究ABCG1 在膽固醇息肉發(fā)病機(jī)制中作用提供基礎(chǔ)；通過(guò)檢測(cè)膽固醇息肉患者膽汁成份、血脂成份，驗(yàn)證它們?cè)谀懝檀枷⑷獍l(fā)病中的作用。
　　 方法：本院60 例因膽囊疾患而行膽囊切除術(shù)患者病例中，剔除息肉合并結(jié)石及膽囊粘膜 RNA 電泳示有RNA 降解或是OD

6、 比值提示有蛋白、DNA 污染的病例， 收集整理得到無(wú)資料缺失的病例計(jì)23 例，其中單純膽囊膽固醇息肉 15例（男 7 例，女8 例，平均年齡46.8±11.54 歲）；對(duì)照組8 例（男 5 例，女3例，平均年齡46.25±10.84），其中膽囊腺瘤樣息肉5 例，早期胰腺腫瘤3 例，兩組年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；分別收集兩組患者空腹靜脈血、膽汁、膽囊壁全層及膽囊粘膜組織，檢測(cè)兩組血脂及膽汁成份，PCR 檢測(cè)兩組膽囊粘膜ABCG1mRNA相對(duì)

7、表達(dá)情況，Western blot 檢測(cè)膽囊粘膜ABCG1 蛋白表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：由于膽囊腺瘤樣息肉標(biāo)本采集困難，本實(shí)驗(yàn)對(duì)照組樣本量相對(duì)較小，而且其中3 例早期胰腺腫瘤患者標(biāo)本，雖無(wú)膽囊頸部結(jié)石、膽囊積液、膽管結(jié)石及嚴(yán)重肝臟、內(nèi)分泌疾病等，但是不能排除原發(fā)疾病是否對(duì)膽囊粘膜相關(guān)分子的表達(dá)產(chǎn)生影響。假定無(wú)上述影響因素情況下，本實(shí)驗(yàn)兩組患者血清膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等脂質(zhì)成分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；兩組患者膽汁

8、成分中，息肉組膽固醇含量及膽固醇飽和指數(shù)與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性（p<0.05），可以認(rèn)為息肉組膽汁膽固醇含量及膽固醇飽和指數(shù)高于對(duì)照組，余膽汁成份兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；息肉組膽囊粘膜ABCG1mRNA 表達(dá)水平高于對(duì)照組(p<0.05)；息肉組膽囊粘膜ABCG1 蛋白表達(dá)同樣高于對(duì)照組。
　　 結(jié)論：膽囊膽固醇息肉組膽囊粘膜ABCG1 的表達(dá)高于對(duì)照組，提示ABCG1在膽固醇息肉疾病的發(fā)展中可能有一定作用；同時(shí)驗(yàn)證了