EZH2、p130及p16在子宮內(nèi)膜癌變過(guò)程中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：子宮內(nèi)膜癌(endometrial carcinoma，EC)是女性生殖系統(tǒng)常見(jiàn)的一種惡性腫瘤，它的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)多因素、多步驟的復(fù)雜過(guò)程。原癌基因的激活，抑癌基因的失活、突變、抗細(xì)胞凋亡等不同的機(jī)制都可能參與其中。一般認(rèn)為子宮內(nèi)膜增生-不典型增生-癌是子宮內(nèi)膜腺癌癌變的經(jīng)典過(guò)程。子宮內(nèi)膜增生，特別是不典型增生是子宮內(nèi)膜癌的重要癌前病變。研究子宮內(nèi)膜癌的癌變對(duì)子宮內(nèi)膜癌的防治具有重要意義。 EZH2基因是1996年發(fā)現(xiàn)的

2、一種新的人類(lèi)基因，定位于人染色體7q35。EZH2基因是果蠅E(z)基因的同源基因，與細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)相關(guān)，通過(guò)抑制染色質(zhì)中的靶基因因而促進(jìn)細(xì)胞增殖。pRb-E2F通路在細(xì)胞增殖和腫瘤形成過(guò)程中起重要作用。EZH2位于pRb-E2F通路的下游，由于去磷酸化的pRb能夠結(jié)合E2F，抑制E2F啟動(dòng)S期的基因轉(zhuǎn)錄，pRb-E2F復(fù)合物結(jié)合于EZH2啟動(dòng)子結(jié)合位點(diǎn)，抑制EZH2啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄。下調(diào)EZH2表達(dá)顯著性地抑制了細(xì)胞生長(zhǎng)，阻滯細(xì)胞于G2/M

3、期。通過(guò)原位雜交技術(shù)，發(fā)現(xiàn)EZH2在多種腫瘤中基因擴(kuò)增，認(rèn)為EZH2是一候選癌基因。EZH2作為轉(zhuǎn)錄抑制因子，在基因水平上抑制多種基因的活性，尤其明顯抑制腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，表現(xiàn)為EZH2蛋白促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移。p130是一個(gè)典型的抑癌基因，屬Rb基因家族。p16基因又稱(chēng)為多種癌抑制因子，是腫瘤抑制基因。生理狀態(tài)下p130和p16通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)錄因子(E2Fs)的活性調(diào)節(jié)而影響EZH2的轉(zhuǎn)錄。p130和p16的表達(dá)抑制了E2F的活性以及后來(lái)

4、細(xì)胞周期的阻滯。研究表明，EZH2異常表達(dá)與白血病的發(fā)生、前列腺癌的轉(zhuǎn)移有關(guān)。迄今為止，有關(guān)EZH2在子宮內(nèi)膜癌變過(guò)程中的表達(dá)及意義的研究工作尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。為探討EZH2在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展的作用及其與p130和p16的表達(dá)相互關(guān)系，本研究對(duì)正常增殖期子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜單純性增生、復(fù)雜性增生、不典型增生和子宮內(nèi)膜癌組織中EZH2、p130和p16在蛋白水平上的表達(dá)情況進(jìn)行了免疫組化分析。 方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)(Immun

5、ohistochemistry，IHC)法檢測(cè)20例增殖期宮內(nèi)膜、20例單純性增生、20例復(fù)雜性增生、20例不典型增生和43例子宮內(nèi)膜腺癌組織中EZH2、p130、p16的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系及三者之間相互作用關(guān)系。 結(jié)果： 1 EZH2在不同性質(zhì)子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)EZH2基因蛋白陽(yáng)性反應(yīng)主要定位于細(xì)胞核，在正常組織間質(zhì)細(xì)胞中也有EZH2蛋白的表達(dá)。在增殖期宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜單純性增生、復(fù)雜性增生、不典型增生和子宮內(nèi)

6、膜腺癌中陽(yáng)性表達(dá)率分別為15.0％、30.0％、40.0％、55.0％、74.4％。EZH2在子宮內(nèi)膜腺癌中的表達(dá)顯著高于正常增殖期宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜單純性增生和復(fù)雜性增生(P<0.05)。在子宮內(nèi)膜腺癌中， G1級(jí)組織中EZH2蛋白陽(yáng)性表達(dá)顯著高于G2+G3級(jí)組織(P<0.05)。 2 p130在不同性質(zhì)子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)p130為胞核陽(yáng)性表達(dá)，呈棕黃色或棕褐色顆粒狀。p130在20例增殖期宮內(nèi)膜中有18例(90.0％)陽(yáng)性表

7、達(dá)，在20例子宮內(nèi)膜單純性增生中有16例(80.0％)陽(yáng)性表達(dá)，在20例復(fù)雜性增生中有14例(70.0％)陽(yáng)性表達(dá)，在20例不典型增生中有11例(55.0％)及在43例子宮內(nèi)膜腺癌中有21例(48.8％)陽(yáng)性表達(dá)；p130蛋白的表達(dá)逐漸降低，差異有顯著性(P<0.05)。p130蛋白在子宮內(nèi)膜腺癌中的表達(dá)顯著高于正常增殖期宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜單純性增生(P<0.05)。在子宮內(nèi)膜腺癌中，p130蛋白的表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)有關(guān)，G2+G3級(jí)組織中

8、p130蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于G1級(jí)組織(P<0.05)，而與其他臨床病例參數(shù)無(wú)關(guān)(P>0.05)。 3 p16在不同性質(zhì)子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)p16陽(yáng)性表達(dá)位于細(xì)胞核或/和細(xì)胞漿，呈棕黃色顆粒。從增殖期宮內(nèi)膜→子宮內(nèi)膜單純性增生→復(fù)雜性增生→不典型增生→子宮內(nèi)膜腺癌癌變的過(guò)程中，p16蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率逐漸降低(90.0％、70.0％、70.0％、50.0％、46.5％)。p16蛋白在子宮內(nèi)膜腺癌中的表達(dá)顯著高于正常增殖期宮內(nèi)膜(

9、P<0.05)。在子宮內(nèi)膜腺癌中，p16蛋白的表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)有關(guān)，G2+G3級(jí)組織中p16蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于G1級(jí)組織(P<0.05)，p16蛋白在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05)。 4 EZH2、p130及p16在子宮內(nèi)膜癌變過(guò)程中的表達(dá)情況的相關(guān)性研究EZH2蛋白呈陽(yáng)性表達(dá)的60例中有30例p130蛋白陽(yáng)性表達(dá)，30例陰性表達(dá)；EZH2蛋白呈陰性表的63例中有50例p130蛋白陽(yáng)性表達(dá)

10、，13例陰性表達(dá)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果表明，在子宮內(nèi)膜癌變過(guò)程中EZH2與p130表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(x<'2>=11.560，P<0.05)。 EZH2蛋白呈陽(yáng)性表達(dá)的60例中有27例p16蛋白陽(yáng)性表達(dá)，33例陰性表達(dá)；EZH2蛋白呈陰性表的63例中有49例p16蛋白陽(yáng)性表達(dá)，14例陰性表達(dá)。EZH2與p16在子宮內(nèi)膜癌變過(guò)程中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(x<'2>=13.871，P<0.05)。 p130蛋白呈陽(yáng)性表達(dá)的80例中有62例p16蛋白陽(yáng)

11、性表達(dá)，18例陰性表達(dá)；p130蛋白呈陰性表的43例中有14例p16蛋白陽(yáng)性表達(dá)，29例陰性表達(dá)。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，表明p130與p16在子宮內(nèi)膜癌變的表達(dá)中呈正相關(guān)關(guān)系(x<'2>2=23.731，P<0.05)。 結(jié)論 1 從增殖期宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜單純性增生、復(fù)雜性增生、不典型增生到子宮內(nèi)膜腺癌，EZH2在蛋白水平上的表達(dá)逐級(jí)增高，而p130和p16蛋白的表達(dá)逐漸下降，提示在蛋白水平上EZH2表達(dá)上調(diào)和p130及p1