熱處理對(duì)STZ-糖尿病性白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：熱休克反應(yīng)是機(jī)體對(duì)一系列損傷的一種快速的、短暫的、保守的細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)過(guò)程，可保護(hù)細(xì)胞免于進(jìn)一步的毒性損害。它包括一些特殊基因片段的激活，并合成保護(hù)細(xì)胞的熱休克蛋白fheat shock protein，HSP)。HSP是生物體在不良環(huán)境因素作用下所產(chǎn)生的一組具有高度保守性的應(yīng)激蛋白。按分子量的大小，HSP分為5類(lèi)，即HSP110、HSP90、HSP70、HSP40和sHSP。晶狀體中AA2晶狀體蛋白、AB2晶狀體蛋白和HSP27屬

2、于sHSP家族。熱休克、氧化應(yīng)激、亞砷酸鈉及高滲等均司誘導(dǎo)HSP70、HSP27的表達(dá)。為探討HSP在糖尿病性白內(nèi)障發(fā)生、發(fā)展中的作用，本課題在糖尿病性白內(nèi)障動(dòng)物模型建立的基礎(chǔ)上，研究STZ性白內(nèi)障的晶狀體上皮細(xì)胞((lens epithelial cells，LECs)熱休克預(yù)處理后HSP70的表達(dá)情況以及晶狀體生化指標(biāo)的變化和可溶性蛋白的含量變化情況。 方法：將30只SD大鼠隨機(jī)分為三組：A組為空白對(duì)照組：正常喂養(yǎng)不給予任何

3、處理；B組為STZ組：正常喂養(yǎng)三天，腹腔注射STZ(55mg/kg)，三天后測(cè)量血糖濃度>16.65mmol/L；C組為熱處理STZ組：正常喂養(yǎng)三天，以10﹪水合氯醛麻醉后，置于45℃水浴箱中維持15min，常溫下放置2小時(shí)，腹腔注射STZ(55mg/kg)，隔日水浴一次，三天后測(cè)量血糖濃度>16．65mmol/L。每周用裂隙燈觀(guān)察晶狀體的變化，在實(shí)驗(yàn)六周后分別摘取眼球，取出晶狀體。采用免疫組化技術(shù)檢測(cè)HSP70在各組LECs中的表達(dá)；

4、運(yùn)用考馬斯亮蘭與呈色法測(cè)定各組可溶性蛋白的濃度；呈色法測(cè)OD值，檢測(cè)各組N-醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及非蛋白旒基(GSH)的含量。 結(jié)果： 1．裂隙燈檢查每周A、B、C各組晶狀體的混濁情況：B、C兩組晶狀體的混濁情況差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B組混濁程度明顯高于C組。A、C兩組差異不顯著。 2．采用免疫組化技術(shù)檢測(cè)HSP70在各組LECs中的表達(dá)：C組HSP70的表達(dá)高于B組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。B組HSP70的