金櫻子對糖尿病大鼠晶狀體上皮細胞凋亡影響的實驗研究.pdf

1、目的:研究金櫻子(Rosa Laevigata Michx,RLM)對糖尿病大鼠晶狀體上皮細胞(Lens epithelial cells,LECs)凋亡的抑制作用,為藥物治療糖尿病性白內(nèi)障提供理論基礎和實驗依據(jù)。
　　研究方法:將60只SD大鼠,按隨機分組原則分為3組,即空白對照組、糖尿病模型組和金櫻子治療組。用鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)誘發(fā)糖尿病性白內(nèi)障,每4周觀察晶狀體的變化。在實驗開始后4周末、8周

2、末、12周末,分別取眼球。采用 DNA缺口末端標記法(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)檢測晶狀體上皮細胞凋亡,免疫組化染色檢測晶狀體上皮細胞 bcl-2、bax蛋白的表達,逆轉錄聚合酶鏈反應(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測

3、bcl-2、bax基因的表達,并利用圖像分析系統(tǒng)測量積分吸光度值進行半定量分析。
　　結果:1、晶狀體混濁情況顯示隨飼養(yǎng)時間延長,金櫻子治療組晶狀體混濁程度明顯輕于糖尿病模型組(P<0.05)。2、TUNEL檢測發(fā)現(xiàn),金櫻子治療組各時限凋亡率均明顯低于糖尿病模型組(P<0.05)。3、免疫組化觀察,bcl-2和bax在正常晶狀體上皮細胞中均有表達,bcl-2的表達遠較bax高;糖尿病模型組bcl-2表達顯著下調(diào),bax表達顯著上調(diào)

4、,bcl-2/bax比率下降;金櫻子治療組可明顯上調(diào)bcl-2蛋白表達,下調(diào)bax蛋白表達,bcl-2/bax比率上升,與糖尿病模型組比較差異有顯著意義。4、逆轉錄聚合酶鏈反應檢測觀察,糖尿病模型組bcl-2 mRNA表達顯著下調(diào),bax mRNA表達顯著上調(diào),bcl-2/bax比率下降;金櫻子治療組可明顯上調(diào)bcl-2 mRNA表達,下調(diào)bax mRNA表達,bcl-2/bax比率上升。
　　結論:金櫻子在一定的劑量和時間范圍內(nèi)