金櫻子對(duì)糖尿病大鼠晶狀體上皮細(xì)胞凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究金櫻子(Rosa Laevigata Michx,RLM)對(duì)糖尿病大鼠晶狀體上皮細(xì)胞(Lens epithelial cells,LECs)凋亡的抑制作用,為藥物治療糖尿病性白內(nèi)障提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　研究方法:將60只SD大鼠,按隨機(jī)分組原則分為3組,即空白對(duì)照組、糖尿病模型組和金櫻子治療組。用鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)誘發(fā)糖尿病性白內(nèi)障,每4周觀察晶狀體的變化。在實(shí)驗(yàn)開始后4周末、8周

2、末、12周末,分別取眼球。采用 DNA缺口末端標(biāo)記法(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)檢測(cè)晶狀體上皮細(xì)胞凋亡,免疫組化染色檢測(cè)晶狀體上皮細(xì)胞 bcl-2、bax蛋白的表達(dá),逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測(cè)

3、bcl-2、bax基因的表達(dá),并利用圖像分析系統(tǒng)測(cè)量積分吸光度值進(jìn)行半定量分析。
　　結(jié)果:1、晶狀體混濁情況顯示隨飼養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),金櫻子治療組晶狀體混濁程度明顯輕于糖尿病模型組(P<0.05)。2、TUNEL檢測(cè)發(fā)現(xiàn),金櫻子治療組各時(shí)限凋亡率均明顯低于糖尿病模型組(P<0.05)。3、免疫組化觀察,bcl-2和bax在正常晶狀體上皮細(xì)胞中均有表達(dá),bcl-2的表達(dá)遠(yuǎn)較bax高;糖尿病模型組bcl-2表達(dá)顯著下調(diào),bax表達(dá)顯著上調(diào)

4、,bcl-2/bax比率下降;金櫻子治療組可明顯上調(diào)bcl-2蛋白表達(dá),下調(diào)bax蛋白表達(dá),bcl-2/bax比率上升,與糖尿病模型組比較差異有顯著意義。4、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)觀察,糖尿病模型組bcl-2 mRNA表達(dá)顯著下調(diào),bax mRNA表達(dá)顯著上調(diào),bcl-2/bax比率下降;金櫻子治療組可明顯上調(diào)bcl-2 mRNA表達(dá),下調(diào)bax mRNA表達(dá),bcl-2/bax比率上升。
　　結(jié)論:金櫻子在一定的劑量和時(shí)間范圍內(nèi)