骨髓干細胞動員治療不同月齡心肌梗死大鼠的實驗研究.pdf

1、骨髓干細胞動員治療心肌梗死是利用細胞因子使主要位于骨髓中的干細胞進入外周血，通過血液循環(huán)到達梗死心肌以達到細胞移植的目的。目前關于骨髓干細胞動員治療心肌梗死的實驗研究多采用青年動物，已取得了一定的研究成果。但心肌梗死多發(fā)生于中老年，且老年人心肌梗死病情嚴重、預后差，同時老年人較少能耐受血管再通術或長期有效的藥物治療。因此，研究骨髓干細胞動員對老年動物(或人)心肌梗死療效的意義更大。為此我們建立了4月齡、18月齡大鼠心肌梗死模型，以粒細胞

2、集落刺激因子為動員劑進行骨髓干細胞動員，以超聲心動圖指標和心肌瘢痕指數(shù)評價其心臟結(jié)構和功能變化。并對4月齡、18月齡心肌梗死大鼠外周血CD34<'+>細胞的動員效果，心肌梗死區(qū)和缺血區(qū)CD34<'+>細胞歸巢的數(shù)量，Bcl-2/Bax凋亡蛋白的表達進行探討。 方 法 4月齡和18月齡雄性Wistar大鼠各30只，隨機分為4月齡假手術組(A組，6只)，4月齡心梗組(B組，6只)，4月齡心梗動員組(E組，6只)，4月齡心梗6

3、d組(G組，6只)，4月齡心梗動員6d組(H組，6只)；18月齡假手術組(C組，6只)，18月齡心梗組(D組，6只)，18月齡心梗動員組(F組，6只)，18月齡心梗6d組(I組，6只)，18月齡心梗動員6d組(J組，6只)。建立冠狀動脈前降支結(jié)扎的心肌梗死模型，建立大鼠心肌梗死模型6h后，動員組每日皮下注射重組人粒細胞集落刺激因子注射液60ug·kg<'-1>，共注射5日。以超聲心動圖指標和心肌瘢痕指數(shù)評價其心臟結(jié)構和功能變化。流式細胞

4、儀檢測大鼠外周血CD34<'+>細胞的比例，免疫組織化學SABC法分別檢測G、H、I和J組大鼠心肌CD34<'+>細胞歸巢的數(shù)量，免疫組織化學SABC法半定量Bcl-2/Bax蛋白的表達。大鼠發(fā)生心肌梗死后，左室功能明顯低于假手術組；盡管制模前4月齡、18月齡大鼠心功能差異無顯著性，但發(fā)生心肌梗死后，4月齡大鼠心功能好于18月齡大鼠。大鼠在心肌梗死后左心室進行性增大，心功能進行性降低。左室增大以4月齡組更顯著，心功能進行性降低以18月齡

5、組明顯。4月齡和18月齡心梗大鼠的心肌瘢痕指數(shù)的差別無統(tǒng)計學意義。 制模后28d時E組大鼠LVEF、LVFS優(yōu)于B組(P<0.01)，F(xiàn)組大鼠LVEF、LVFS優(yōu)于D組(P<0.01)，4月齡和18月齡心肌梗死大鼠動員后心功能改善程度的差異無統(tǒng)計學意義。不同時間點B組與E組，D組與F組的LVDD和LVDS比較差異無統(tǒng)計學意義。4月齡和18月齡心肌梗死大鼠動員后左室重構的變化程度的差異無統(tǒng)計學意義。E組心肌瘢痕指數(shù)低于B組(P=0

6、.013)和F組低于D組(P=0.048)。對所有心梗大鼠的LVEF與平均心肌瘢痕指數(shù)之間進行直線相關分析，r=0.716，P<0.01。表明二者之間存在線性負相關。 制模后3天各組CD34+細胞比值H組高于G組(P=0.001)，J組高于I組(P=0.001)；制模后6天各組CD34<'+>細胞比值H組高于G組(P<0.01)，J組高于I組(P<0.01)，H組高于J組(P=0.006)。H組CD34<'+>細胞心肌歸巢的數(shù)量

7、高于J組。H組心肌細胞Bcl-2表達的灰度值低于G組，J組低于I組，P均<0.01；各組Bax表達的灰度值差異無顯著性。 4月齡大鼠和18月齡大鼠制作心肌梗死模型后心功能均進行性降低，同時發(fā)生左室重構。18月齡大鼠心肌梗死后心功能減低較4月齡大鼠明顯，但4月齡大鼠左室重構更顯著。干細胞動員治療4月齡和18月齡心肌梗死大鼠后，大鼠的心功能改善，心肌瘢痕指數(shù)降低；但不同月齡心肌梗死大鼠經(jīng)干細胞動員后的治療效果無差異；心肌瘢痕指數(shù)與心