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文檔簡介
1、骨髓干細(xì)胞動(dòng)員治療心肌梗死是利用細(xì)胞因子使主要位于骨髓中的干細(xì)胞進(jìn)入外周血,通過血液循環(huán)到達(dá)梗死心肌以達(dá)到細(xì)胞移植的目的。目前關(guān)于骨髓干細(xì)胞動(dòng)員治療心肌梗死的實(shí)驗(yàn)研究多采用青年動(dòng)物,已取得了一定的研究成果。但心肌梗死多發(fā)生于中老年,且老年人心肌梗死病情嚴(yán)重、預(yù)后差,同時(shí)老年人較少能耐受血管再通術(shù)或長期有效的藥物治療。因此,研究骨髓干細(xì)胞動(dòng)員對(duì)老年動(dòng)物(或人)心肌梗死療效的意義更大。為此我們建立了4月齡、18月齡大鼠心肌梗死模型,以粒細(xì)胞
2、集落刺激因子為動(dòng)員劑進(jìn)行骨髓干細(xì)胞動(dòng)員,以超聲心動(dòng)圖指標(biāo)和心肌瘢痕指數(shù)評(píng)價(jià)其心臟結(jié)構(gòu)和功能變化。并對(duì)4月齡、18月齡心肌梗死大鼠外周血CD34<'+>細(xì)胞的動(dòng)員效果,心肌梗死區(qū)和缺血區(qū)CD34<'+>細(xì)胞歸巢的數(shù)量,Bcl-2/Bax凋亡蛋白的表達(dá)進(jìn)行探討。 方 法 4月齡和18月齡雄性Wistar大鼠各30只,隨機(jī)分為4月齡假手術(shù)組(A組,6只),4月齡心梗組(B組,6只),4月齡心梗動(dòng)員組(E組,6只),4月齡心梗6
3、d組(G組,6只),4月齡心梗動(dòng)員6d組(H組,6只);18月齡假手術(shù)組(C組,6只),18月齡心梗組(D組,6只),18月齡心梗動(dòng)員組(F組,6只),18月齡心梗6d組(I組,6只),18月齡心梗動(dòng)員6d組(J組,6只)。建立冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎的心肌梗死模型,建立大鼠心肌梗死模型6h后,動(dòng)員組每日皮下注射重組人粒細(xì)胞集落刺激因子注射液60ug·kg<'-1>,共注射5日。以超聲心動(dòng)圖指標(biāo)和心肌瘢痕指數(shù)評(píng)價(jià)其心臟結(jié)構(gòu)和功能變化。流式細(xì)胞
4、儀檢測大鼠外周血CD34<'+>細(xì)胞的比例,免疫組織化學(xué)SABC法分別檢測G、H、I和J組大鼠心肌CD34<'+>細(xì)胞歸巢的數(shù)量,免疫組織化學(xué)SABC法半定量Bcl-2/Bax蛋白的表達(dá)。大鼠發(fā)生心肌梗死后,左室功能明顯低于假手術(shù)組;盡管制模前4月齡、18月齡大鼠心功能差異無顯著性,但發(fā)生心肌梗死后,4月齡大鼠心功能好于18月齡大鼠。大鼠在心肌梗死后左心室進(jìn)行性增大,心功能進(jìn)行性降低。左室增大以4月齡組更顯著,心功能進(jìn)行性降低以18月齡
5、組明顯。4月齡和18月齡心梗大鼠的心肌瘢痕指數(shù)的差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 制模后28d時(shí)E組大鼠LVEF、LVFS優(yōu)于B組(P<0.01),F(xiàn)組大鼠LVEF、LVFS優(yōu)于D組(P<0.01),4月齡和18月齡心肌梗死大鼠動(dòng)員后心功能改善程度的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不同時(shí)間點(diǎn)B組與E組,D組與F組的LVDD和LVDS比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4月齡和18月齡心肌梗死大鼠動(dòng)員后左室重構(gòu)的變化程度的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。E組心肌瘢痕指數(shù)低于B組(P=0
6、.013)和F組低于D組(P=0.048)。對(duì)所有心梗大鼠的LVEF與平均心肌瘢痕指數(shù)之間進(jìn)行直線相關(guān)分析,r=0.716,P<0.01。表明二者之間存在線性負(fù)相關(guān)。 制模后3天各組CD34+細(xì)胞比值H組高于G組(P=0.001),J組高于I組(P=0.001);制模后6天各組CD34<'+>細(xì)胞比值H組高于G組(P<0.01),J組高于I組(P<0.01),H組高于J組(P=0.006)。H組CD34<'+>細(xì)胞心肌歸巢的數(shù)量
7、高于J組。H組心肌細(xì)胞Bcl-2表達(dá)的灰度值低于G組,J組低于I組,P均<0.01;各組Bax表達(dá)的灰度值差異無顯著性。 4月齡大鼠和18月齡大鼠制作心肌梗死模型后心功能均進(jìn)行性降低,同時(shí)發(fā)生左室重構(gòu)。18月齡大鼠心肌梗死后心功能減低較4月齡大鼠明顯,但4月齡大鼠左室重構(gòu)更顯著。干細(xì)胞動(dòng)員治療4月齡和18月齡心肌梗死大鼠后,大鼠的心功能改善,心肌瘢痕指數(shù)降低;但不同月齡心肌梗死大鼠經(jīng)干細(xì)胞動(dòng)員后的治療效果無差異;心肌瘢痕指數(shù)與心
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