四君子湯對(duì)埃坡霉素B化療的減毒作用及其化學(xué)成分研究.pdf

1、化療藥物能有效控制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，但由于化療藥物是細(xì)胞毒性的藥物且大部分的化療藥物不具有靶向性，對(duì)正常細(xì)胞亦具有殺傷作用。即使嚴(yán)格控制藥物的使用途徑、使用方法、使用劑量，依然無(wú)法避免各種不良反應(yīng)?；熕幬镌谥委熁颊叩耐瑫r(shí)也給患者帶來(lái)了巨大的痛苦。因此提高化療患者生存質(zhì)量是一個(gè)亟待解決的問(wèn)題。
　　四君子湯由人參、白術(shù)、茯苓、甘草按照一定比例煎煮而成。四君子湯可以用于治療血液循環(huán)系統(tǒng)，消化系統(tǒng)疾病和代謝性疾病。且現(xiàn)代藥理研究表明，該

2、復(fù)方對(duì)腫瘤的治療具有減毒增效作用。
　　本課題主要研究四君子湯提取物對(duì)化療小鼠的減毒作用，并對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行含量測(cè)定和結(jié)構(gòu)分析。建立了埃坡霉素B化療的動(dòng)物模型，探討了四君子湯總提物對(duì)埃坡霉素B化療后小鼠存活率的影響，并考察了四君子湯總提物對(duì)化療減毒作用的各項(xiàng)指標(biāo)的影響。通過(guò)正丁醇萃取，將四君子湯總提物分為脂溶性成分和水溶性成分來(lái)分析。水溶性成分經(jīng)過(guò)60％乙醇醇沉，分為多糖B部位和多糖C部位。用比色法測(cè)定脂溶性成分中黃酮和皂苷含量，

3、并用液相色譜儀測(cè)定其中甘草苷、人參皂苷Rg1和甘草酸的含量。比色法測(cè)定多糖B部位總糖含量并采用核磁共振手段對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步的定性和定量分析。
　　成功建立埃坡霉素B引起小鼠損傷的化療動(dòng)物模型?？疾彀Ｆ旅顾谺和四君子湯提取物的給藥劑量，最終選擇4.0mg/kg埃坡霉素B和0.2g/kg四君子湯提取物作為最終的給藥劑量?？疾焖木訙崛∥飳?duì)埃坡霉素B化療減毒作用的各項(xiàng)指標(biāo)的影響。結(jié)果表明四君子湯提取物可以有效提高小鼠存活率，顯著提高小

4、鼠白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和骨髓DNA含量，顯著降低小鼠腸道腸桿菌的數(shù)量。
　　比色法測(cè)定四君子湯脂溶性成分中總黃酮和總皂苷的含量。結(jié)果表明總黃酮含量為11.17％，總皂苷含量為24.16％。更進(jìn)一步采用UPLC-PDA測(cè)定其中代表性物質(zhì)甘草苷、人參皂苷Rg1和甘草酸的含量，為四君子湯質(zhì)量控制提供依據(jù)。結(jié)果表明四君子湯中甘草苷含量為13.12mg/g，人參皂苷Rg1的含量為6.46mg/g，甘草酸的含量為13.00mg

5、/g。
　　比色法測(cè)定四君子湯多糖B部位的糖含量。測(cè)定結(jié)果表明中性糖含量為68.90％，酸性糖含量為2.99％。單糖組成分析結(jié)果表明，四君子湯多糖B部位由木糖、果糖、葡萄糖組成。
　　采用1H-NMR、13C-NMR和HSQC譜對(duì)四君子湯-B糖殘基進(jìn)行初步NMR指紋圖譜的定性和定量研究。定性研究結(jié)果表明其中可能含有→6)-β-D-Glcp-(1→，→6)-α-D-Glcp-(1→，→1)-α-D-Glcp，-2)-β-D-F

6、ru，→1)-α-L-Araf和→1)-α-L-Araf-(3，5→糖殘基。其中→6)-α-D-Glcp-(1→，→6)-β-D-Glcp-(1→和→1)-α-D-Glcp糖殘基來(lái)源于四種單味藥;→2)-β-D-Fru來(lái)源于人參、甘草和白術(shù);→1)-α-L-Araf-(3，5→和→1)-α-L-Araf糖殘基主要來(lái)源于白術(shù)。基本的定性分析之后，采用NMR定量的方法，以糖殘基的各個(gè)異頭碳?xì)湫盘?hào)作為參比峰，對(duì)主要的糖殘基進(jìn)行了含量測(cè)定。結(jié)果