Saralasin聯(lián)合孕激素對子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞系增殖與凋亡的影響.pdf

1、目的：
　　子宮內(nèi)膜癌(carcinoma of endometrium)是女性生殖器官的一種常見惡性惡性腫瘤，年輕患者約占10％（年齡＜40歲），近年來，子宮內(nèi)膜癌患者呈現(xiàn)年輕化趨勢，保留生育功能的子宮內(nèi)膜癌內(nèi)分泌治療顯得愈為重要，同時(shí)，如何延緩長期應(yīng)用大劑量孕激素后孕激素耐藥現(xiàn)象的發(fā)生，對于延長患者生存壽命，滿足其生育要求有著深遠(yuǎn)的意義。
　　本實(shí)驗(yàn)采用MTT方法測定血管緊張素Ⅱ1型受體(angiotensinrecep

2、tor1，AT1R)抑制劑Saralasin與孕激素單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用時(shí)對孕激素敏感健康子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞系增殖的影響，應(yīng)用AnnexinⅤ-FITC試劑盒及流式細(xì)胞儀觀察AT1R抑制劑Saralasin與孕激素單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用對Ishikawa細(xì)胞系凋亡的作用，Transwell共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)檢測AT1R抑制劑Saralasin與孕激素單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用時(shí)子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞系的遷移。研究AT1R抑制劑Saralasin及孕激

3、素在子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞增殖、凋亡及對細(xì)胞遷移方面的影響，并探討兩種藥物應(yīng)用是否存在協(xié)同作用。
　　材料和方法：
　　1、材料
　　(1)細(xì)胞系健康人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞系（雌激素受體與孕激素受體表達(dá)陽性）于我校實(shí)驗(yàn)室保存。
　　(2)試劑醋酸甲羥孕酮(MPA)、AT1R抑制劑Saralasin（沙拉新）、MTT購于Sigma公司，AnnexinⅤ-FITC試劑盒購自凱基生物公司。Transw

4、ell小室購于Corning公司。
　　2、實(shí)驗(yàn)方法
　　5應(yīng)用MTT方法檢測出各實(shí)驗(yàn)組Ishikawa細(xì)胞增殖，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡，Transwell共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)檢測各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞遷移。
　　3、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，所有數(shù)據(jù)以Mean±SD表示，P＜0.05設(shè)定為具有顯著性差異標(biāo)準(zhǔn)。
　　結(jié)果：
　　1、細(xì)胞增殖的抑制Saralasin與及孕激素單獨(dú)用藥時(shí)

5、，與對照組相比均可抑制子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞的增殖(P＜0.05)，呈濃度-時(shí)間效應(yīng)。當(dāng)藥物處理24h后，隨著濃度的增加，藥物抑制作用較為明顯，因而在藥物聯(lián)合實(shí)驗(yàn)中，我們將各處理組作用24h后進(jìn)行檢測，低濃度Saralasin與低濃度孕激素聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，可協(xié)同抑制Ishikawa細(xì)胞的增殖，中-高濃度時(shí)，Saralasin與孕激素?zé)o明顯協(xié)同作用，可出現(xiàn)拮抗作用。
　　2、細(xì)胞凋亡Saralasin與孕激素單獨(dú)作用時(shí)，可提高子

6、宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞的早期凋亡及晚期凋亡(P＜0.05)，呈濃度依賴型，Saralasin與孕激素聯(lián)合應(yīng)用可協(xié)同增加Ishikawa細(xì)胞的凋亡率(P＜0.05)。
　　3、Transwell細(xì)胞遷移Saralasin及孕激素單獨(dú)用藥均可抑制子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞的的遷移，呈濃度依賴型，濃度約高，其抑制效果越明顯，Saralasin聯(lián)合孕激素用藥未明顯提高Ishikawa細(xì)胞遷移的抑制率。
　　結(jié)論：
　

7、　1、低濃度Saralasin與孕激素聯(lián)合可產(chǎn)生協(xié)同作用，提高Ishikawa細(xì)胞的抑制率，但中-高濃度Sarlasin聯(lián)合孕激素應(yīng)用時(shí)并沒有產(chǎn)生協(xié)同作用，相反可產(chǎn)生拮抗作用。
　　2、Saralasin及孕激素在Ishikawa細(xì)胞系中可促進(jìn)其早期及晚期凋亡，并呈濃度-時(shí)間效應(yīng)，聯(lián)合應(yīng)用可提高凋亡率。
　　3、Saralasin及孕激素可抑制Ishikawa細(xì)胞的遷移，隨著藥物作用濃度的升高，此抑制效果愈加明顯，但藥物聯(lián)合