黃連對大鼠的抗焦慮作用研究.pdf

1、　　目的：通過正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)研究黃連總生物堿最佳提取方法；通過大鼠高架十字迷宮和明暗箱實(shí)驗(yàn),觀察黃連總生物堿對大鼠焦慮行為的影響,并通過測定大鼠腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)含量和研究黃連總生物堿在大鼠體內(nèi)組織分布來探討其抗焦慮作用機(jī)制。
　　方法：
　?、?黃連總生物堿提取工藝優(yōu)選：采用 L16(44)正交表,以黃連總生物堿的含量為評價(jià)指標(biāo),觀察乙醇濃度(A)、乙醇用量(B)、提取時(shí)間(C)和提取次數(shù)( D)四種因素對黃連總生物堿提取

2、工藝的影響,優(yōu)選出黃連總生物堿的最佳提取工藝；
　?、?黃連抗焦慮實(shí)驗(yàn)：雄性大鼠,灌胃給予不同劑量的黃連浸膏混懸液,連續(xù)灌胃5d,然后在大鼠高架十字迷宮裝置、明暗箱裝置上觀察黃連對大鼠焦慮行為的影響。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后分取大鼠全腦,并采用酶聯(lián)免疫法測定大鼠左腦內(nèi)γ-氨基丁酸、谷氨酸和 5-羥色胺遞質(zhì)含量；
　?、?黃連總生物堿在大鼠體內(nèi)組織分布研究：行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,分取大鼠右腦、心、肝、脾、肺、腎、胃臟,采用高效液相

3、色譜法測定各臟器黃連生物堿含量。
　　結(jié)果：
　?、?影響黃連提取效果的因素順序?yàn)橐掖紳舛?提取時(shí)間>乙醇用量>提取次數(shù)；黃連總生物堿最佳提取工藝為用12倍量70%的乙醇溶液回流提取3次,提取時(shí)間每次1h。最佳工藝所得黃連干浸膏提取率為25.59%,浸膏中黃連總生物堿含量達(dá)52.90%,原藥材中總生物堿含量達(dá)13.54%。
　?、?黃連總生物堿在大鼠高架十字迷宮模型上表現(xiàn)出抗焦慮作用,其作用效果與地西泮相比

4、無顯著性差異。黃連總生物堿能顯著降低大鼠腦內(nèi)5-HT的含量,與地西泮相比無顯著性差異；黃連總生物堿高、中劑量組有升高腦內(nèi)GABA含量的趨勢,黃連總生物堿各組有降低腦內(nèi)Glu含量的趨勢；黃連總生物堿各劑量組均有降低Glu/GABA的趨勢。
　?、?小檗堿主要分布在大鼠的胃中,其次為肝和心；腦中也有分布,只是含量相對偏低；巴馬汀主要分布在胃、脾、肺和肝臟中,心、腦和腎臟中未檢測到；藥根堿主要分布在胃中,其次是脾臟,腎、肝、心和腦中

5、也有少量。三種生物堿總量由大到小分別為：胃>脾>肝>心>肺>腦>腎。
　　結(jié)論：
　?、?黃連總生物堿最佳提取工藝為用12倍量70%的乙醇溶液回流提取3次,提取時(shí)間每次1h,所得黃連浸膏中生物堿總量可達(dá)50%以上；此種方法可作為黃連有效部位的提取方法,從而進(jìn)行下一步的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。
　?、?黃連生物堿具有明顯的抗焦慮作用,其抗焦慮機(jī)制與降低大鼠腦內(nèi) 5-HT的含量有關(guān)；可能與提高腦內(nèi)γ-GABA 的含量,降低