新型納米顆粒對頭頸部腫瘤放射線增敏及其機制研究.pdf

1、第一部分:
　　 偶聯(lián)C225的Fe3O4/Ag復(fù)合納米顆粒表征及其對人鼻咽癌細(xì)胞放射增敏作用初步研究
　　 [背景與目的]:
　　 放射治療是惡性腫瘤的重要治療手段之一。隨著放療設(shè)備、影像及計算機技術(shù)等快速發(fā)展，出現(xiàn)了影像引導(dǎo)下的放射治療(IGRT)。但臨床上至今仍未有理想經(jīng)影像介導(dǎo)的IGRT的特異性示蹤劑，如何增加腫瘤放射的敏感性也一直是腫瘤放射治療領(lǐng)域中倍受關(guān)注的問題。本研究旨在構(gòu)建新型多功能復(fù)合納米顆粒，

2、可同時作為惡性腫瘤的MRI示蹤劑、放射線的增敏劑以及抗腫瘤制劑。
　　 [方法]:
　　 制備Fe3O4/Ag/C225，并表征透射電子顯微鏡(TEM)，能量彌散X射線光譜儀（Energy-dispersiveX-rayspectroscopy，EDS），紫外吸收光譜和動態(tài)光散射(DLS)表征復(fù)合納米顆粒Fe3O4/Ag/C225;ELISA法檢測偶聯(lián)抗體西妥昔單抗(cetuximab，C225)在復(fù)合納米顆粒Fe3O4

3、/Ag中的活性保存度;光鏡下觀察人鼻咽癌腫瘤細(xì)胞系(CNEs)在不同濃度Fe3O4/Ag/C225的形態(tài)學(xué)改變;MTT比色法初步檢測Fe3O4/Ag/C225復(fù)合納米顆粒檢測其抑制CNEs生長抑制效果;流式細(xì)胞術(shù)檢測CNE在不同濃度下Fe3O4/Ag/C225的凋亡情況;磁共振（MRI）下觀測Fe3O4/Ag/C225成像情況;克隆形成實驗檢測Fe3O4/Ag/C225復(fù)合納米顆粒聯(lián)合X-ray作用下CNE克隆形成能力;WesternB

4、lot法檢測Fe3O4/Ag/C225聯(lián)合X-ray后EGFR蛋白表達(dá)。
　　 [結(jié)果]:
　　 TEM示復(fù)合納米顆粒Fe3O4/Ag/C225顯示復(fù)合材料表征;能量色散X射線光譜儀(EDS)及紫外吸收光譜可見Fe和Ag的特征峰;紫外吸收光譜(UV)和動態(tài)光散射(DLS)檢測顯示偶聯(lián)C225后的特征;ELISA檢測證實在復(fù)合納米顆粒Fe3O4/Ag/C225上C225保持度大于80％;光鏡下觀察及MTT法檢測均提示復(fù)合納

5、米顆粒Fe3O4/Ag/C225對鼻咽癌腫瘤細(xì)胞有明顯抑制作用;根據(jù)MTT結(jié)果計算，24h和48hIC50分別為350.49±3.14μg/ml和262.53±4.47μg/ml;流式細(xì)胞術(shù)檢測CNE在不同濃度下Fe3O4/Ag/C225的凋亡明顯增加;克隆形成實驗顯示Fe3O4/Ag/C225復(fù)合納米顆粒增強了CNE的放射線敏感性，增敏比(SER)達(dá)2.262倍;WesternBlot法檢測提示Fe3O4/Ag/C225聯(lián)合X-ray