TNF-α對CD15、CD15s及ST3GaL家族蛋白的影響.pdf

1、目的：
　　 CD15抗原是Lewis血型抗原之一,又稱LeX,屬細胞粘附分子(cell adhesion molecules,CAMs)成員。CAMs是位于細胞表面的糖蛋白,與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關。CD15s抗原是CD15抗原的唾液酸化形式,也屬于細胞粘附分子,它是E-選擇素的主要配體,它通過結合含有E-選擇素的血小板、粒細胞及內(nèi)皮細胞促進癌灶細胞轉移。
　　 細胞粘附分子受多種因素的調節(jié),特別是細胞因子的作用

2、。腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是具有廣泛生物學活性的細胞因子,可通過激活細胞內(nèi)信號通路使胞內(nèi)儲存的細胞粘附分子轉移到細胞表面從而使細胞膜表面該分子增加。已有研究表明:TNF-α能夠誘導多種腫瘤中CD分子含量上調,如TNF-α能夠誘導人胰腺癌細胞株SW-1990細胞表面粘附分子CD44含量上調,從而影響腫瘤細胞遷移等細胞生物學功能。但TNF-α對胃肝腫瘤細胞系中細胞粘附分子CD15及CD15

3、s的影響未見相關報道。本課題旨在研究CD15,CD15s分子在胃,肝腫瘤及正常細胞系中的含量與腫瘤遷移能力的關系,并研究TNF-α對肝癌細胞系CD15,CD15s及ST3Gal家族蛋白的影響。
　　 方法：
　　 應用細胞芯片檢測人正常胃粘膜細胞系GES-1、具有轉移潛能人胃腺癌細胞系SGC-7901、人淋巴結轉移胃癌細胞系HGC-27,人正常肝上皮細胞系L-02、人原發(fā)性肝癌細胞系HepG-2、人高轉移肝癌細胞系SMM

4、C-7721表面是否存在CD15、CD15s抗原;用Western blot方法驗證細胞芯片結果,檢測上述幾種腫瘤及正常細胞系中CD15及CD15s的含量;同時檢測TNF-α對肝癌細胞系中CD15,CD15s及ST3GaL家族蛋白的影響。
　　 結果：
　　 細胞芯片檢測發(fā)現(xiàn)具有轉移潛能人胃腺癌細胞系SGC-7901及人淋巴結轉移胃癌細胞系HGC-27表面CD15、CD15s抗原含量明顯高于人正常胃粘膜細胞系GES-1;

5、人正常肝上皮細胞系L-02表面CD15、CD15s抗原含量較少;人原發(fā)性肝癌細胞系HepG-2及人高轉移肝癌細胞系SMMC-7721表面CD15、CD15s抗原含量均較高;Western blot檢測發(fā)現(xiàn),CD15在具有轉移潛能胃癌細胞系SGC-7901和淋巴結轉移性胃癌細胞系HGC-27中含量明顯高于正常胃粘膜細胞系GES-1;在高轉移性肝癌細胞系SMMC7721中含量明顯高于原發(fā)性肝癌細胞系HepG-2及正常肝上皮細胞系L-02;C

6、D15s在正常胃粘膜細胞系GES-1、具有轉移潛能胃癌細胞系SGC-7901、淋巴結轉移性胃癌細胞系HGC-27中含量逐漸增加,在正常肝上皮細胞系L-02、原發(fā)性肝癌細胞系HepG-2、高轉移性肝癌細胞系SMMC-7721中含量也逐漸增加。與細胞芯片結果基本一致。TNF-α處理的肝癌細胞系中,原發(fā)性肝癌細胞系HepG-2的CD15含量較對照組下調(P＜0.05),CD15s含量較對照組明顯上調(P＜0.05),但CD15和CD15s在高

7、轉移肝癌細胞系SMMC-7721中含量較對照組無明顯改變(P＞0.05);經(jīng)TNF-α處理的HepG-2細胞系的ST3GaL家族蛋白(6種)中ST3GaL-Ⅱ,ST3GaL-Ⅳ表達較對照組明顯上調(P＜0.05),其它四種ST3Gal-Ⅰ、ST3Gal-Ⅲ、ST3Gal-Ⅴ和ST3Gal-Ⅵ表達無明顯變化(P＞0.05)。
　　 結論：
　　 1、細胞芯片和Western blot檢測部分胃,肝腫瘤及正常細胞系CD15,

8、CD15s抗原,發(fā)現(xiàn)CD15,CD15s抗原在人胃癌細胞系SGC-7901,HGC-27中含量高于正常細胞系GES-1,在人肝癌細胞系HepG-2,SMMC7721中含量高于正常細胞系L-02,在人高轉移肝癌細胞系SMMC-7721中含量高于人原發(fā)性肝癌細胞系HepG-2中的含量。
　　 2、在人原發(fā)性肝癌細胞系HepG-2中,TNF-α導致CD15s含量增加同時減少CD15的含量。
　　 3、當人原發(fā)性肝癌細胞系Hep