枸骨根抗大鼠心肌缺血作用及其機(jī)制研究.pdf

1、隨著社會人口的老齡化，心血管疾病已成為嚴(yán)重威脅人類健康的主要疾病。而多種心血管疾病都與心肌缺血有著密切的關(guān)系。近年來，中藥憑其在治療心肌缺血方面療效好，副作用小的優(yōu)勢受到關(guān)注。
　　枸骨(Ilex cornuta Lindl)為冬青科常綠植物，近年來，對其的藥理研究成果較多，而且不斷地深入，主要涉及循環(huán)系統(tǒng)的冠心病、高血壓、高血脂癥以及內(nèi)分泌系統(tǒng)的肥胖等[1]。上述研究均為枸骨的葉。枸骨根味苦、性涼。民間用于肝腎不足、腰膝疾弱、關(guān)

2、節(jié)疼痛、頭風(fēng)、牙痛[2,3]。我們發(fā)現(xiàn)枸骨根含有多種黃酮和皂苷類化學(xué)成分[4,5]，本研究從心肌細(xì)胞、動物模型等多方面對枸骨根醇提物進(jìn)行抗心肌缺血缺氧的作用及機(jī)制研究。
　　目的：篩選枸骨根活性部位和探討該活性部位抗心肌缺血作用及機(jī)制。
　　方法：采用2,2-二苯基-1-苦味肼基自由基（DPPH）法、心肌細(xì)胞缺氧實(shí)驗(yàn)、離體血管平滑肌實(shí)驗(yàn)篩選枸骨根活性部位；采用垂體后葉素和異丙腎上腺素所致大鼠心肌缺血損傷實(shí)驗(yàn)、冠狀動脈結(jié)扎實(shí)驗(yàn)

3、、心肌細(xì)胞缺氧實(shí)驗(yàn)、離體血管平滑肌實(shí)驗(yàn)來觀察枸骨根活性部位對心肌缺血的影響。
　　結(jié)果：枸骨根提取物能顯著提高自由基的清除率，對雙氧水（H2O2）和硫代硫酸鈉（Na2S3O3·5H2O）誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞的損傷具有顯著的保護(hù)作用，能抑制由苯腎上腺素（phenylephrine，PE）誘導(dǎo)收縮的大鼠胸主動脈環(huán)，其中30％與60%醇提部分活性較強(qiáng)，因此選定30%+60%醇提部份為研究對象；枸骨根活性部位（60mg/kg,120mg/k

4、g）能減少由垂體后葉素和異丙腎上腺素導(dǎo)致的心律失常、T波的改變以及降低異丙腎上腺素所致大鼠血清中CK、LDH等的活性；能明顯降低在體冠脈結(jié)扎引起的心肌缺血面積和大鼠血清中CK、LDH、MDA等的活性，增加SOD的活性。對H2O2誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞的凋亡具有顯著的保護(hù)作用；枸骨根活性部位(250-10000μg/ml)能明顯舒張由PE(1μM)和KCL(60 mM)誘導(dǎo)收縮的大鼠胸主動脈環(huán)；預(yù)先給予枸骨根活性部位(2000 or8000μ

5、g/ml)，能抑制由PE和KCL誘導(dǎo)收縮的大鼠胸主動脈環(huán)；在血管條內(nèi)皮完整的時候，N′-硝基-L-精氨酸(100μM)和亞甲基藍(lán)(10μM)能明顯抑制枸骨根活性部位對血管條的舒張影響，而吲哚美辛(5μM)作用不明顯；在血管條內(nèi)皮去除的時候，格列苯脲(10μM)、四乙銨(5 mM)、氯化鋇(10μM)及4-氨基吡啶(100μM)能抑制枸骨根活性部位對血管條的舒張作用；枸骨根活性部位能減少PE(1μM)誘導(dǎo)的在無鈣液中血管條的短暫收縮幅度及