心肌缺血預(yù)處理聯(lián)合缺血后處理對大鼠心肌保護(hù)作用的研究.pdf

1、研究背景：心肌缺血再灌注損傷(MIRI)的防治在心臟外科手術(shù)中占有極其重要的地位，自從1977年Hearse首次提出MIRI的概念以來，隨著冠狀動(dòng)脈搭橋術(shù)、經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈血管成形術(shù)等心臟病學(xué)的不斷發(fā)展，當(dāng)前已成為眾多專家學(xué)者研究的熱點(diǎn)問題。當(dāng)今心肌缺血預(yù)處理(IPC)和缺血后處理(IPO)是兩種對抗MIRI常用而有效的心肌保護(hù)方法。而對于IPC和IPO的聯(lián)合應(yīng)用是否對MIRI有更好療效現(xiàn)在國內(nèi)外研究較少，且目前仍存在爭議。由于再灌注過

2、程伴隨大量的心肌細(xì)胞凋亡，許多專家學(xué)者推測IPC和IPO的心肌保護(hù)作用可能與細(xì)胞凋亡有關(guān)，而IPC和IPO對心肌再灌注后細(xì)胞凋亡的影響研究較少。本研究以調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡基因家族中的基本成員Bcl-2，Bax為切入點(diǎn)評價(jià)IPC和IPO聯(lián)合作用對MIRI的保護(hù)作用。 對象：大鼠心肌缺血預(yù)處理、缺血后處理、心肌缺血預(yù)處理聯(lián)合缺血后處理及心肌缺血再灌注損傷模型。 目的：探討心肌缺血預(yù)處理和缺血后處理聯(lián)合作用對大鼠心肌缺血再灌注損傷的

3、保護(hù)作用。 方法：雄性Wistar大鼠48只，建立大鼠心肌缺血再灌注模型，隨機(jī)分為四組(每組12只)：(1)對照組(I/R組，n=12)：阻斷冠狀動(dòng)脈左前降支(LAD)30min，再灌注120min；(2)缺血預(yù)處理組(IPC組，n=12)：阻斷LAD前先阻斷LAD5min，再灌注5min，循環(huán)3次，余同I/R組；(3)缺血后處理組(IPO組，n=12)：阻斷LAD30min后，再通30秒，阻斷30秒，重復(fù)三次，再灌注120mi

4、n；(4)缺血預(yù)處理后處理聯(lián)合作用組(IPC+IPO組，n=12)：阻斷LAD前先阻斷LAD5min，再灌注5min，循環(huán)3次，再次阻斷LAD30min后，再通30秒，阻斷30秒，循環(huán)3次后再灌注120min。觀測指標(biāo)：肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖記錄再灌注時(shí)的心律失常發(fā)生情況；再灌注末自右心房抽血1ml，離心后測定血清中丙二醛(MDA)的含量；測定心肌含水量；用TTC染色法經(jīng)圖像分析測定心肌梗死面積；HE染色法光鏡心肌組織病理學(xué)觀察；免疫組化SP

5、法檢測大鼠心肌Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果：心律失常發(fā)生率I/R組83.3％，。IPC組8.3％，IPO組16.6％，IPC+IPO組16.6％。I/R組與其余3組相比心律失常發(fā)生率明顯增高(p＜0.007)，其余3組之間無明顯差別(p=1.000)。IPO組、IPC組及IPO+IPC組較I/R組血清中MDA含量減少，差異顯著(p＜0.01)，IPO組、IPC組、IPO+IPC組三組間比較無明顯差別。I/R組與IPC、

6、IPO、IPC+IPO三組之間心肌含水量相比有顯著性差異(p＜0.05)，IPC、IPO、IPC+IPO三組之間比較無明顯差別(p＞0.05)。光鏡觀察IPC組、IPO組和IPC+IPO組心肌損傷的程度較I/R組明顯減輕，IPC組、IPO組和IPC+IPO組具有相似的形態(tài)學(xué)變化。IPO組、IPC組及IPO+IPC組較I/R組心肌梗死面積顯著減少(p＜0.05)，IPO組、IPC組、IPO+IPC組三組間比較無明顯差別。免疫組化SP法檢測

7、結(jié)果IPC組、IPO組和IPC+IPO組與I/R組相比Bax表達(dá)水平明顯降低(p＜0.01)，Bcl-2表達(dá)水平明顯升高(p＜0.05)，而其余三組之間無明顯差別。 結(jié)論： 1、心肌缺血預(yù)處理與后處理聯(lián)合作用可減輕再灌注損傷，減少再灌注心律失常發(fā)生率，縮小心肌梗死面積，減少心肌含水量，降低MDA含量，對心肌細(xì)胞有明顯的保護(hù)。 2、心肌缺血預(yù)處理與缺血后處理以及聯(lián)合作用對心肌保護(hù)作用的機(jī)制可能與bcl-2基因表達(dá)上