冬蟲夏草治療NOD小鼠增加外周淋巴結(jié)的Treg細(xì)胞數(shù)推遲Ⅰ型糖尿病的發(fā)病.pdf

1、背景與目的:
　　胰島素依賴性糖尿病(insulin-dependentdiabetesmellitus，IDDM)即糖尿?、裥?typeⅠdiabetesmellitus，T1DM)是伴隨一生的慢性代謝異常性疾病，由再次自身免疫應(yīng)答破壞胰腺胰島β細(xì)胞引起的胰島素絕對(duì)缺乏導(dǎo)致疾病發(fā)生。通常在兒童、青春期少年或早期成年人確定診斷該疾病，與精神性、家族性或社會(huì)性疾病有密切關(guān)系。全世界大約有3.5億糖尿病患者，在世界上不同的國(guó)家Ⅰ型糖尿

2、新增病例數(shù)以每年大約3％速率增加，尤其在少年兒童中更常見。流行病學(xué)調(diào)查顯示Ⅰ型糖尿病發(fā)病率有地理差異，每年發(fā)病率在中國(guó)約1/10萬至芬蘭約40.9/10萬之間變化。這一器官特異性的破壞由Th1淋巴細(xì)胞介導(dǎo)，由易感基因、環(huán)境因素和其他危險(xiǎn)性因素相互作用引起。
　　冬蟲夏草在傳統(tǒng)的中草藥中長(zhǎng)期以來已經(jīng)被廣泛應(yīng)用。在中國(guó)冬蟲夏草常用以治療呼吸系統(tǒng)疾病，然而其療效仍然缺乏實(shí)驗(yàn)證據(jù)。糖尿?、裥褪且环N多因素相關(guān)的自身免疫性疾病，細(xì)胞免疫應(yīng)答參

3、與破壞人胰島中β細(xì)胞。本研究檢測(cè)冬蟲夏草作為免疫調(diào)節(jié)劑在NOD小鼠治療中的作用及其機(jī)制的初步探討。
　　方法:
　　非肥胖性糖尿病小鼠是目前應(yīng)用最廣，也是最受大家歡迎和認(rèn)可的的人糖尿?、裥蛣?dòng)物模型。雌性非肥胖性糖尿病小鼠從上海史萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購(gòu)進(jìn)，在無特定病原體環(huán)境飼養(yǎng)。非肥胖性糖尿病小鼠被隨機(jī)分成2組，其中每一組共20只。(a)冬蟲夏草治療組，糖尿病發(fā)病之前的雌性NOD小鼠（4周齡），每天用冬蟲夏草提取物給NOD小鼠灌胃

4、治療(4mg/kg)共4周;(b)PBS對(duì)照組，與治療組相同每天使用等體積的PBS灌胃處理共4周。血糖每?jī)芍軝z測(cè)1次。治療組和對(duì)照組的小鼠采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)其胸腺、引流淋巴結(jié)和脾臟組織中調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(CD25+Foxp3+Treg，Treg)細(xì)胞占輔助性T細(xì)胞(TCRβ+CD4+Th，Th)細(xì)胞百分率。檢測(cè)胰腺引流淋巴結(jié)中輔助性T淋巴細(xì)胞Ⅰ型(IFNγ+CD44+Th1)占CD4+輔助性T淋巴細(xì)胞(TCRβ+CD4+Th，Th)細(xì)

5、胞百分率。
　　結(jié)果:
　　1.冬蟲夏草治療組糖尿病的發(fā)生被推遲2周以上。對(duì)照組NOD小鼠10周齡時(shí)大約30％出現(xiàn)糖尿病，然而治療組大約在14周齡時(shí)達(dá)到相同的發(fā)病率。
　　2.與對(duì)照組相比，治療組外周引流淋巴結(jié)調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(CD25+Foxp3+Treg，Treg)細(xì)胞占輔助性T細(xì)胞（TCRβ+CD4+Th，Th）細(xì)胞百分率顯著增加(P＜0.05)。與對(duì)照組相比，治療組脾臟中調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(CD25+Foxp3+

6、Treg，Treg)細(xì)胞占輔助性T細(xì)胞(TCRβ+CD4+Th，Th)細(xì)胞百分率降低，沒有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　3.治療組和對(duì)照組相比，nTreg細(xì)胞占CD4+細(xì)胞的百分率變化沒有明顯差異（P＞0.05）。
　　4.IFN-γ產(chǎn)生的CD44+CD4+Th1細(xì)胞占CD4+細(xì)胞的百分率在治療組比對(duì)照組明顯升高(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　我們的工作證明冬蟲夏草提取物治療可以推遲NOD小鼠糖尿病的