冬蟲夏草治療NOD小鼠增加外周淋巴結的Treg細胞數(shù)推遲Ⅰ型糖尿病的發(fā)病.pdf

1、背景與目的:
　　胰島素依賴性糖尿病(insulin-dependentdiabetesmellitus，IDDM)即糖尿病Ⅰ型(typeⅠdiabetesmellitus，T1DM)是伴隨一生的慢性代謝異常性疾病，由再次自身免疫應答破壞胰腺胰島β細胞引起的胰島素絕對缺乏導致疾病發(fā)生。通常在兒童、青春期少年或早期成年人確定診斷該疾病，與精神性、家族性或社會性疾病有密切關系。全世界大約有3.5億糖尿病患者，在世界上不同的國家Ⅰ型糖尿

2、新增病例數(shù)以每年大約3％速率增加，尤其在少年兒童中更常見。流行病學調查顯示Ⅰ型糖尿病發(fā)病率有地理差異，每年發(fā)病率在中國約1/10萬至芬蘭約40.9/10萬之間變化。這一器官特異性的破壞由Th1淋巴細胞介導，由易感基因、環(huán)境因素和其他危險性因素相互作用引起。
　　冬蟲夏草在傳統(tǒng)的中草藥中長期以來已經(jīng)被廣泛應用。在中國冬蟲夏草常用以治療呼吸系統(tǒng)疾病，然而其療效仍然缺乏實驗證據(jù)。糖尿病Ⅰ型是一種多因素相關的自身免疫性疾病，細胞免疫應答參

3、與破壞人胰島中β細胞。本研究檢測冬蟲夏草作為免疫調節(jié)劑在NOD小鼠治療中的作用及其機制的初步探討。
　　方法:
　　非肥胖性糖尿病小鼠是目前應用最廣，也是最受大家歡迎和認可的的人糖尿?、裥蛣游锬Ｐ汀４菩苑欠逝中蕴悄虿⌒∈髲纳虾Ｊ啡R克實驗動物中心購進，在無特定病原體環(huán)境飼養(yǎng)。非肥胖性糖尿病小鼠被隨機分成2組，其中每一組共20只。(a)冬蟲夏草治療組，糖尿病發(fā)病之前的雌性NOD小鼠（4周齡），每天用冬蟲夏草提取物給NOD小鼠灌胃

4、治療(4mg/kg)共4周;(b)PBS對照組，與治療組相同每天使用等體積的PBS灌胃處理共4周。血糖每兩周檢測1次。治療組和對照組的小鼠采用流式細胞技術檢測其胸腺、引流淋巴結和脾臟組織中調節(jié)性T淋巴細胞(CD25+Foxp3+Treg，Treg)細胞占輔助性T細胞(TCRβ+CD4+Th，Th)細胞百分率。檢測胰腺引流淋巴結中輔助性T淋巴細胞Ⅰ型(IFNγ+CD44+Th1)占CD4+輔助性T淋巴細胞(TCRβ+CD4+Th，Th)細

5、胞百分率。
　　結果:
　　1.冬蟲夏草治療組糖尿病的發(fā)生被推遲2周以上。對照組NOD小鼠10周齡時大約30％出現(xiàn)糖尿病，然而治療組大約在14周齡時達到相同的發(fā)病率。
　　2.與對照組相比，治療組外周引流淋巴結調節(jié)性T淋巴細胞(CD25+Foxp3+Treg，Treg)細胞占輔助性T細胞（TCRβ+CD4+Th，Th）細胞百分率顯著增加(P＜0.05)。與對照組相比，治療組脾臟中調節(jié)性T淋巴細胞(CD25+Foxp3+

6、Treg，Treg)細胞占輔助性T細胞(TCRβ+CD4+Th，Th)細胞百分率降低，沒有顯著統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　3.治療組和對照組相比，nTreg細胞占CD4+細胞的百分率變化沒有明顯差異（P＞0.05）。
　　4.IFN-γ產(chǎn)生的CD44+CD4+Th1細胞占CD4+細胞的百分率在治療組比對照組明顯升高(P＜0.05)。
　　結論:
　　我們的工作證明冬蟲夏草提取物治療可以推遲NOD小鼠糖尿病的