洛伐他汀和地塞米松對成骨細胞凋亡及Caspase-3活性影響的實驗研究.pdf

1、目的：研究觀察超生理劑量地塞米松對成骨細胞調(diào)亡及caspase-3表達產(chǎn)生的影響；觀察加用洛伐他汀后對地塞米松引起的成骨細胞凋亡及caspase-3活性的影響。 方法：（1）用改良組織塊法培養(yǎng)SD大鼠乳鼠顱骨的成骨細胞，用差速貼壁法進行純化；（2）從形態(tài)學，堿性磷酸酶染色（偶氮偶聯(lián)法）和礦化結節(jié)染色（茜素紅法）方面對成骨細胞進行鑒定；（3）取生長旺盛的第3-5代成骨細胞隨機分為空白組：培養(yǎng)基中含配制辛伐他汀溶液的對照液；對照組：

2、培養(yǎng)基中含地塞米松（1×10-6mol/l）和配制辛伐他汀溶液的對照液；實驗組：分4組，各組培養(yǎng)基中含地塞米松（1×10-6mol/l）+洛伐他汀（1×10-9mol/l，1×10-8mol/l，1×10-7 mol/l，1×10-6mol/l）；每組細胞分別培養(yǎng)24，48，72小時后作檢測；（4）用細胞凋亡Hoechst33258熒光檢測試劑盒和Caspase-3分光光度法檢測試劑盒檢測各組加入培養(yǎng)基24h、48h、72h后成骨細胞的

3、凋亡率及caspase-3的活性。 結果：（1）培養(yǎng)出來的細胞具有成骨細胞的形態(tài)特征，堿性磷酸酶染色和礦化結節(jié)染色為陽性；（2）與空白組相比，對照組地塞米松（10-6mol/l）對成骨細胞的凋亡率及caspase-3的活性均有促進作用，差異有統(tǒng)計學意義（P<0．05），48h達高峰；（3）與對照組相比，洛伐他汀濃度為10-8mol/l、10-7mol/l、10-6mol/l的實驗組對成骨細胞的凋亡率及caspase-3的活性有抑

4、制作用，差異有統(tǒng)計學意義（P<0．05）；10-9mol/l濃度實驗組上述指標與對照組相比差異無統(tǒng)計學意義（P>0．05）。 結論：（1）地塞米松能夠誘導成骨細胞凋亡，增加成骨細胞caspase-3的活性；（2）洛伐他汀可部分抑制地塞米松誘導的成骨細胞的凋亡，且有一定濃度依賴性；（3）地塞米松誘導體外培養(yǎng)的成骨細胞凋亡部分通過激活caspase-3實現(xiàn)的。（4）洛伐他汀抑制地塞米松誘導的成骨細胞凋亡與其抑制地塞米松引起的casp