水溶性CdTe量子點(diǎn)的生物標(biāo)記及其生物應(yīng)用.pdf

1、本論文探討了本實(shí)驗(yàn)室自行合成的水溶性CdTe量子點(diǎn)作為一種新型的熒光納米探針材料在生物應(yīng)用方面的可能性，研究內(nèi)容主要包括CdTe量子點(diǎn)與蛋白分子的共價連接; 量子點(diǎn)-蛋白標(biāo)記物的純化和表征; 采用直接熒光免疫法，對固定和活的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞膜上、細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的靶分子進(jìn)行了特異性細(xì)胞成像。 在水相CdTe量子點(diǎn)標(biāo)記各種蛋白分子的實(shí)驗(yàn)中，我們系統(tǒng)的優(yōu)化了量子點(diǎn)濃度、EDC濃度、蛋白濃度、反應(yīng)時間等標(biāo)記條件。成功用EDC一步法連接量子點(diǎn)

2、和各種蛋白分子,其中蛋白分子包括了一般的非特異性牛血清蛋白BSA、糖蛋白荊豆凝集素UEA-1以及抗體anti-vWF。第一次運(yùn)用激光誘導(dǎo)熒光的毛細(xì)管電泳對量子點(diǎn)的標(biāo)記產(chǎn)物進(jìn)行了分析。同時采用超濾離心裝置對標(biāo)記產(chǎn)物進(jìn)行了純化分離，達(dá)到了去除未結(jié)合蛋白的量子點(diǎn)以及除鹽濃縮的效果。我們通過激光誘導(dǎo)熒光的毛細(xì)管電泳的表征手段證明：標(biāo)記蛋白的含量高達(dá)96％。用離心超濾方法純化標(biāo)記產(chǎn)物的效果也很明顯，通過純化，QD-BSA的含量從43.6％提高到了

3、97.1％，QD-UEA-1的含量從68.8％提高到了82.5％。 在將量子點(diǎn)的蛋白標(biāo)記物應(yīng)用到細(xì)胞成像的研究中，我們建立了一套量子點(diǎn)作為熒光探針用于固定細(xì)胞和活細(xì)胞的成像的方法,并對我們合成的水相CdTe量子點(diǎn)潛在的應(yīng)用價值進(jìn)行了探索。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：熒光探針QD-UEA-1能夠特異性標(biāo)記經(jīng)過固定處理的或活的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞膜上的靶分子L-fucose；熒光探針QD-anti-vWF也特異性地標(biāo)記了固定處理過的人臍靜脈內(nèi)皮