朊蛋白誘導(dǎo)的量子點(diǎn)聚集及其生物分析應(yīng)用.pdf

1、量子點(diǎn)(又稱(chēng)半導(dǎo)體納米晶，quantum dots，QDs)，是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的新型熒光納米材料。由于其直徑小(與核酸、蛋白質(zhì)等相近)、光學(xué)性能卓越(寬吸收、窄發(fā)射、光穩(wěn)定性好等)、生物相容性良好等優(yōu)點(diǎn)，在生命科學(xué)研究中備受青睞，被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞和活體成像、熒光共振能量轉(zhuǎn)移的研究、生物大分子檢測(cè)等領(lǐng)域。朊蛋白(Proin Protein)是一種能在動(dòng)物和人類(lèi)中引起多種神經(jīng)變性型疾病的傳染性蛋白，其致病機(jī)理是正常的朊蛋白發(fā)生錯(cuò)誤折疊，形成

2、富含β折疊的抗蛋白酶水解的致病型朊蛋白。不穩(wěn)定的致病型朊蛋白繼續(xù)發(fā)生強(qiáng)烈的聚集，進(jìn)而自組裝成低聚物、纖維前體和淀粉樣纖維結(jié)構(gòu)。本文主要的研究工作如下：
　　 (1)合成了熒光性能優(yōu)良的巰基乙酸修飾的CdTe QDs，以重組人朊蛋白(rPrP)為模式蛋白，研究了朊蛋白誘導(dǎo)的CdTe QDs的聚集和CdTe QDs對(duì)朊蛋白纖維化的影響。
　　 (2)基于朊蛋白誘導(dǎo)CdTe QDs發(fā)生聚集的現(xiàn)象，以CdTe QDs為熒光探針，

3、對(duì)朊蛋白進(jìn)行了可視化定性、半定量的檢測(cè)，并利用CdTe QDs與朊蛋白相互作用后上清熒光強(qiáng)度的降低和上清熒光最大發(fā)射波長(zhǎng)的藍(lán)移分別對(duì)朊蛋白進(jìn)行了定量檢測(cè)。共存物質(zhì)的干擾試驗(yàn)表明該檢測(cè)方法選擇性好，靈敏度高。同時(shí)也檢測(cè)了表達(dá)朊蛋白的大腸桿菌裂解液中朊蛋白的含量。透射電子顯微鏡(TEM)實(shí)驗(yàn)表明，在二者聚集產(chǎn)生的沉淀中存在蛋白質(zhì)纖維和淀粉樣斑塊，證實(shí)CdTe QDs的聚集與朊蛋白纖維化過(guò)程有關(guān)。
　　 (3)基于朊蛋白優(yōu)先導(dǎo)致大粒徑