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文檔簡介
1、目的:觀察丹參(Salvia miltiorrhiza)、血府逐瘀湯(Xuefuzhuyu soup)含藥血清對體外培養(yǎng)的兔骨髓間充質干細胞增殖、遷移的影響,以及服藥前后血清SDF—1濃度的變化。 方法:新西蘭大耳兔24只隨機分為空白對照組、丹參組和血府逐瘀湯組(下簡稱血府組),每組8只,灌胃法喂服動物中藥水煎液,分別給予蒸餾水、丹參水煎液和血府逐瘀湯水煎液7天,并于服藥前后抽取動脈血提取血清;使用密度梯度離心法、貼壁篩選法分離
2、、培養(yǎng)兔BMSCs,倒置顯微鏡下連續(xù)觀察細胞形態(tài)變化,利用甲基偶氮唑鹽(MTT)法繪制BMSCs生長曲線,免疫組化檢測CD44+、Vimentin表達;TRANSWELL遷移實驗系統(tǒng)觀察各組含藥血清對BMSCs遷移情況,MTT法測定BMSCs倍增時間;ELISA法測定血清SDF-1濃度。 結果: 1、利用密度梯度離心法可成功培養(yǎng)BMSCs,培養(yǎng)的BMSCs表面CD44和Vimentin表達陽性率分別為91.4%和88.7
3、%。 2、空白對照組、丹參組、血府組BMSCs的倍增時間(54.27±7.2)h、(47.35±4.2)h、(48.12±3.98)h,與對照組比較,丹參、血府組與空白對照組比較均有顯著差異(P<0.05),丹參和血府組二者差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 3、空白對照組、丹參組、血府組遷移細胞數(shù)分別為11±6、18±5、20±4,與對照組比較,丹參組和血府組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 4、空白對照組、
4、丹參組、血府組服藥前后血清SDF-1濃度比較,空白對照組(P>0.05)、丹參組(P<0.05)、血府逐瘀湯(P<0.05)。 結論: 1、體外培養(yǎng)的兔BMSCs一般形狀、細胞表面標記符合BMSCs特征,增殖活性良好。 2、丹參和血府逐瘀湯含藥血清均能促進體外培養(yǎng)的兔BMSCs的遷移。 3、丹參和血府逐瘀湯含藥血清均能顯著促進體外培養(yǎng)兔BMSCs的倍增。 4、丹參和血府逐瘀湯二者的促進體外培養(yǎng)的兔
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