聚乳酸-聚乙醇酸支架種植自體細(xì)胞構(gòu)建組織工程食管替換犬頸段食管的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增犬自體種子細(xì)胞，自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為上皮樣細(xì)胞；設(shè)計(jì)制作人工生物可降解支架；將自體種子細(xì)胞種植于支架上構(gòu)建組織工程食管；以組織工程食管移植替代犬部分頸段食管。方法：體外培養(yǎng)自體食管上皮細(xì)胞和肌成纖維細(xì)胞，自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞以表皮生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)分化，免疫細(xì)胞化學(xué)等鑒定；聚乳酸-聚乙醇酸(PLGA)材料以粒子浸出法結(jié)合模壓或注塑成型制作多孔支架，進(jìn)行組織學(xué)、電鏡等檢測(cè)；靜態(tài)和動(dòng)態(tài)種植細(xì)胞于支架上，培養(yǎng)構(gòu)建組織

2、工程食管，進(jìn)行組織學(xué)、免疫組化、電鏡等檢測(cè)；以組織工程食管置入替換部分犬頸段食管，胃造瘺給予營(yíng)養(yǎng)，不同時(shí)間點(diǎn)處死取材進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：成功分離并培養(yǎng)擴(kuò)增了自體種子細(xì)胞，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可以誘導(dǎo)分化為上皮樣細(xì)胞，其細(xì)胞角蛋白及上皮膜抗原免疫細(xì)胞化學(xué)染色陽(yáng)性；PLGA支架有一定力學(xué)強(qiáng)度，孔隙率90％左右，孔徑180～280μm；種子細(xì)胞在PLGA支架上黏附生長(zhǎng)良好，體外可成功構(gòu)建組織工程食管；術(shù)后犬長(zhǎng)期存活，人工食管早期輕度擴(kuò)張，后趨于正常，