環(huán)氧化酶-2及相關因子在閉合性機械性顱腦損傷中的表達和意義.pdf

1、目的：本實驗通過復制Marmarou's大鼠閉合性顱腦損傷模型，采用組織芯片及免疫組化技術，研究閉合性腦損傷后COX-2、GluR2、PAF-R在腦組織中的表達部位、時序性特點及三者之間的相互關系。 方法：采用清潔級SD大鼠88只，體重350-400g。隨機分為對照組及損傷后1h組、2h組、4h組、8h組、12h組、24h組、2d組、3d組、5d組、7d組。 復制Marmarou's落體打擊損傷模型。進行4％多聚甲醛灌注

2、固定、取材。HE、甲苯胺藍染色觀察病理改變。用組織芯片儀制作組織芯片，SP法檢測腦組織COX-2、GluR2、PAF-R的表達情況。采用Mias2000圖像分析系統(tǒng)采集并計算陽性細胞數(shù)和陽性細胞面積。以P＜0.05為顯著性差異的水準。全部數(shù)據(jù)均采用SPSS11.5forwindows分析軟件進行統(tǒng)計處理。 結果：1病理學改變：損傷組可見硬膜下出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血。皮質(zhì)、海馬等部位部分神經(jīng)元深染、固縮，部分腫脹、深染。 2

3、COX-2免疫組織化學染色結果：對照組頂葉皮層、海馬腦底皮層部位均有少量免疫反應陽性細胞表達，損傷后陽性細胞表達增多。損傷后1h-3d，頂葉皮層陽性細胞計數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，5d時差別有顯著意義(p＜0.05)，12h達最大值；損傷后2h-5d，COX-2免疫反應陽性細胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，8h時達最大值。 損傷后1h-5d，CA4區(qū)COX-2免疫反應陽性細胞數(shù)與對照組比

4、較差別有極顯著意義(p＜0.01)，7d差別有顯著意義(p＜0.05)，8h達最大值；損傷后1h-3d，陽性細胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，5d時差別有顯著意義(p＜0.05)，8h達最大值。 損傷后1h-5d，CA3區(qū)COX-2免疫反應陽性細胞計數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，8h達最大值；損傷后1h-5d，陽性細胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，8h達最大值。

5、損傷后1h-3d，腦底皮層COX-2免疫反應陽性細胞計數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12h達最大值；損傷后1h-5d，陽性細胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12h達最大值。 3GluR2免疫組織化學染色結果：對照組項葉皮層、海馬等部位均有免疫反應陽性細胞大量表達。損傷后陽性細胞表達減少。損傷后1h-7d，頂葉皮層GluR2免疫反應陽性細胞計數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12

6、h達最低值；損傷后1h-7d，陽性細胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，24h達最大值。 損傷后2h-3d，CA4區(qū)GluR2免疫反應陽性細胞計數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，5d時差別有顯著意義(p＜0.05)，12h達最大值；損傷后2h-7d，陽性細胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12h達最低值。損傷后2h-7d，CA3區(qū)GluR2免疫反應陽性細胞計數(shù)與對照組比較差別有極顯

7、著意義(p＜0.01)，5d時差別有顯著意義(p＜0.05)，24h達最低值；損傷后2h-7d，陽性細胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，24h達最低值。 損傷后2h-7d，腦底皮層GluR2免疫反應陽性細胞計數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12h達最低值；損傷后1h-7d，陽性細胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12h達最低值。 4PAF-R免疫組織化學染色結果：對照組

8、頂葉皮層、胼胝體內(nèi)有較多免疫反應陽性膠質(zhì)細胞表達。損傷后，陽性膠質(zhì)細胞表達減少。損傷后1h-2d，頂葉皮層PAF-R免疫反應陽性細胞計數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，3d、5d時差別有顯著意義(p＜0.05)，12h達最低值；損傷后1h-7d，陽性細胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12h達最低值。 損傷后1h-7d，胼胝體內(nèi)PAF-R免疫反應陽性細胞計數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.0

9、1)，12h達最低值；損傷后1h-7d，陽性細胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，24h達最低值。 結論：1腦損傷后PAF-R表達在損傷后1h下降，12-24h達最低，7d時仍低于正常。表達的細胞以神經(jīng)膠質(zhì)細胞為主，及少量的錐體細胞表達。2正常時GluR2在皮質(zhì)、海馬錐體細胞均有表達，損傷后各部位表達基本一致，損傷后1h后下降，12-24h達最低值，7d時有些部位仍低于正常。3腦損傷后，COX-2表達在1-2h開