氟西汀預(yù)處理對高血糖SD大鼠局部腦缺血再灌注損傷保護作用的研究.pdf

1、目的：探討在高血糖狀態(tài)下，預(yù)防性應(yīng)用氟西汀對SD大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷是否具有神經(jīng)保護作用及其可能的機制。 方法：健康雄性SD大鼠72只，血糖正常（小于6mmol/l），隨機分為3組（n=24）：假手術(shù)組、對照組、氟西汀組。各組按缺血2h再灌注Oh、2h、6h、24h分為4個亞組（n=6）。氟西汀組大鼠于術(shù)前14天開始給予氟西汀混懸液（2.0mg/kg）灌胃，1次/天；假手術(shù)組和對照組均于術(shù)前14天開始給予等容積0.9%氯化

2、鈉溶液灌胃，1次/天。各組大鼠均于缺血術(shù)前30分鐘腹腔注射50%葡萄糖溶液（3g/kg），建立高血糖模型。栓線前測血糖值達11.1mmol/l表示建模成功。 采用改良Longa-Zea氏線栓法制備SD大鼠右側(cè)大腦中動脈閉塞的腦缺血再灌注模型（假手術(shù)組僅暴露右側(cè)頸總動脈，不做缺血再灌注），于插線2h后拔出栓線，按各再灌注時間點實行再灌注。參照Zea-Longa5分制評分標(biāo)準(zhǔn)進行神經(jīng)功能缺損評分；2%氯化三苯四唑啉（TTC）染色并用

3、圖像分析系統(tǒng)測量腦梗死體積；HE染色觀察腦組織病理形態(tài)；免疫組織化學(xué)法檢測IL-1β、Caspase-3的表達。 結(jié)果： 1.神經(jīng)功能缺損評分：相同再灌注時間點，對照組較假手術(shù)組神經(jīng)功能缺損癥狀明顯，差異均具有顯著性意義（p<0.01）；氟西汀組較對照組神經(jīng)功能缺損評分降低，其中再灌注0h、2h、6h兩組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（p>0.05），再灌注24h兩組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。 2.腦梗

4、死體積比較：假手術(shù)組未見腦梗死灶；對照組、氟西汀組均于腦缺血2h即出現(xiàn)梗死灶，隨再灌注時間的延長，對照組再灌注24h內(nèi)腦梗死體積逐漸增大，氟西汀組腦梗死體積至再灌注6h達高峰，此后逐漸下降；相同再灌注時間點，氟西汀組腦梗死體積較對照組減小，至再灌注24h兩組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。 3.腦組織病理形態(tài)觀察：假手術(shù)組雙側(cè)腦組織層次分明，神經(jīng)細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常；對照組缺血區(qū)腦組織排列紊亂，神經(jīng)細胞皺縮、變性，組織間水

5、腫，可見空泡化改變；各相同再灌注時間點，氟西汀組與對照組比較，缺血區(qū)變性、壞死的神經(jīng)元數(shù)量減少，空泡樣改變減輕，組織間水腫減輕。 4.免疫組化結(jié)果比較： （1）IL-1β的表達：對照組、氟西汀組在腦缺血2h可見少量IL-1β陽性表達細胞，再灌注2h后IL-1β陽性表達細胞數(shù)開始增加，均于再灌注6h達高峰，隨后逐漸下降；對照組較假手術(shù)組IL-1β陽性表達細胞數(shù)增多，再灌注2h、6h、24h差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01

6、）；氟西汀組較對照組IL-1β陽性表達細胞數(shù)明顯減少，再灌注2h、6h兩組間比較為p<0.05，再灌注24h為p<0.01。 （2）Caspase-3的表達：對照組、氟西汀組在腦缺血2h可見少量Caspase-3陽性表達細胞，再灌注2h后Caspase-3陽性表達細胞數(shù)開始增加，均于再灌注24h達高峰；對照組較假手術(shù)組Caspase-3陽性表達細胞數(shù)增多，再灌注2h、6h、24h差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）；氟西汀組較對照

7、組Caspase-3陽性表達細胞數(shù)明顯減少，再灌注2h、6h兩組間比較為p<0.05，再灌注24h為p<0.01。 結(jié)論： 1.IL-1β、Caspase-3的表達均參與了高血糖狀態(tài)下SD大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的病理生理過程。 2.預(yù)防性應(yīng)用氟西汀能夠減輕高血糖狀態(tài)下SD大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷，減輕神經(jīng)功能缺損癥狀，縮小腦梗死體積，減輕神經(jīng)細胞變性、壞死及組織水腫，減少缺血側(cè)大腦皮質(zhì)IL-1β和同側(cè)海馬區(qū)