利用天然陽離子聚合物殼聚糖提高有效性的口服疫苗微球的研究.pdf

1、本課題致力于將疫苗藥物制備成口服有效的陽離子微球制劑，拓展疫苗的應用范圍。微球的粒徑大小、疏水性、荷電性等理化性質都直接影響到微球給藥系統(tǒng)的靶向作用、轉運效率和免疫效果。針對影響M細胞攝取微球的這三大主要因素，本課題中分別以親水性材料海藻酸鈉、殼聚糖(Cs)，疏水性材料乳酸/羥基乙酸共聚物（PLGA）作為載體，以牛血清白蛋白（BSA）為模型藥物制備表面包裹殼聚糖的陽離子微球，考察不同類型的載體材料對微球的形態(tài)、粒徑、蛋白包封率、載藥量、

2、表面荷電情況和釋放行為的影響。 論文的第一章中，以親水性材料海藻酸鈉和殼聚糖為載體材料，采用乳化交聯(lián)法制得BSA 海藻酸鈉/殼聚糖微球，80％以上的微球粒徑在1 μm ～10μm，微球表面帶正電，包封率為（81.4±1.5）％，載藥量為（6.4±0.1）％，但是在模擬胃液和模擬腸液中突釋都很明顯（0.5 h內(nèi)超過60％），在模擬腸液中釋藥速度很快，2h內(nèi)基本釋放完全。 論文的第二章，以疏水性材料PLGA和親水性材料殼聚糖

3、為載體材料，采用W/O/W 復乳-溶劑揮發(fā)法制得BSA PLGA/Cs微球，90％以上的微球粒徑在1μm～10μm，隨著外水相中殼聚糖濃度的增加，微球表面由帶負電轉變?yōu)閹д?，包封率為?0.4±6.3）％，載藥量為（8.4±0.3）％。與PLGA微球相比，殼聚糖的加入顯著地減少了突釋，延緩了釋藥速度。殼聚糖的分子量對釋藥速度影響顯著。 論文第三章，以雞新城疫苗為模型藥物，創(chuàng)新性地采用S/O/W乳化-溶劑揮發(fā)法制備得到雞新城疫苗

4、PLGA/殼聚糖陽離子微球。采用紅血球凝集反應（HA）測定疫苗的效價，考察制備過程中各工藝因素對疫苗活性的影響。采用血凝抑制反應（HI）檢測動物血清中的抗體水平，對微球口服免疫效果做出初步評價。結果表明：疫苗活性的喪失主要來自于有機溶劑和長時間的常溫下磁力攪拌，而且與常規(guī)W/O法制備初乳的過程相比，S/O法可以明顯地保護疫苗的活性。當口服PLGA/殼聚糖微球中藥量為滴鼻劑量的10倍時，可以產(chǎn)生與滴鼻免疫相當?shù)拿庖咝Ч?，明顯優(yōu)于PLGA

5、微球組。 論文的第四章，以乙肝疫苗為模型藥物制備PLGA/殼聚糖陽離子微球，并采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）對口服微球產(chǎn)生的的體液免疫效果做初步評價。制得的微球表面帶正電，微球平均粒徑為3.86μm，95％以上的微球粒徑小于10μm。測得微球的包封率為（70.7±3.2）％，載藥量為（9.45±0.11）％。皮下注射組產(chǎn)生的抗體水平顯著高于PLGA口服微球組和PLGA/Cs口服微球組，而PLGA/Cs口服微球組的抗體水平優(yōu)于