溴苯腈對(duì)小鼠肝組織能量代謝的影響及巰基化合物的干預(yù).pdf

1、目的： 1.探討溴苯腈對(duì)小鼠離體肝組織線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ～Ⅳ活性的影響。 2.建立溴苯腈急性中毒模型，觀察溴苯腈對(duì)小鼠肝組織能量代謝的影響，并探巰基化合物二巰丙磺鈉(Na-DMPS)、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)對(duì)其的干預(yù)。 方法： 1.差速離心法分離提取ICR小鼠肝組織線粒體，隨機(jī)分成正常對(duì)照組與溴苯腈染毒組，每組6個(gè)樣本，染毒組線粒體懸浮液加入終濃度為130 mg/L的97％溴苯腈原藥，兩組均于

2、30℃培養(yǎng)箱內(nèi)孵育0.5 h后，分光光度法測(cè)定肝組織離體線粒體呼吸鏈酶復(fù)合物Ⅰ～Ⅳ活性。 2.ICR小鼠40只，每組8只，隨機(jī)分成正常對(duì)照組(A組)、溴苯腈急性中毒組(B組)、Na-DMPS組(C組)、NAC組(D組)與NAC聯(lián)用Na-DMPS(E組)組，用反相高效液相色譜(RP-HPLC)法測(cè)定各組小鼠肝組織腺苷酸ATP、ADP、AMP含量，并計(jì)算總腺苷酸(TAN)及細(xì)胞能荷(EC)值；電鏡觀察各組肝細(xì)胞線粒體超顯微結(jié)構(gòu)改變。

3、 3.用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示，多組間差異比較采用單因素方差分析，兩組間差異比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有顯著性意義。 結(jié)果： 1.肝組織線粒體懸液體外溴苯腈染毒后，線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ活性較正常對(duì)照組明顯降低(P<0.05)，呼吸鏈復(fù)合物Ⅱ活性有升高趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2.與A組比較，B組小鼠肝組織ATP、TAN含量

4、和EC水平均明顯降低(P<0.05)，AMP含量均較A組升高(P<0.05)。 3.與B組比較，藥物干預(yù)組(C、D、E組)ATP含量、EC水平均明顯升高(P<0.05)，AMP含量均明顯下降(P<0.05)，E組TAN含量較B組明顯升高(P<0.05)，C、D組TAN含量有升高趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；兩藥單用組(C組與D組)比較，各指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；兩藥聯(lián)用組(E組)與C、D組比較，EC水

5、平較C組升高(P<0.05)，較D組略高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，ATP、TAN含量有升高趨勢(shì)，AMP含量有降低趨勢(shì)，但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 4.B組肝細(xì)胞線粒體明顯腫脹，線粒體嵴斷裂，數(shù)量減少，甚至空泡化；藥物干預(yù)組(C、D、E組)肝細(xì)胞線粒體病變均較B組明顯減輕，表現(xiàn)為散在的肝細(xì)胞線粒體輕度腫脹。 結(jié)論： 1.小鼠肝組織離體線粒體經(jīng)溴苯腈染毒后，線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ活性降低

6、，可能為溴苯腈急性中毒所致能量代謝障礙機(jī)制之一。 2.小鼠溴苯腈急性中毒導(dǎo)致肝組織能量代謝障礙，可能為溴苯腈急性中毒肝組織損傷毒理機(jī)制之一。 3.巰基化合物Na-DMPS、NAC單用及聯(lián)用均可改善小鼠溴苯腈急性中毒所致的肝組織能量代謝障礙，對(duì)肝組織有較好的保護(hù)作用，以兩者聯(lián)用效果最佳。 4.溴苯腈染毒后，小鼠肝細(xì)胞線粒體損傷較明顯，經(jīng)巰基化合物Na-DMPS、NAC單用及聯(lián)用干預(yù)后，線粒體病變明顯減輕，可能與其改