COX-2、p53和c-myc在皮膚腫瘤中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：采用組織芯片技術(shù)檢測環(huán)氧化酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)、p53和c-myc在皮膚鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma，SCC)、基底細(xì)胞癌(basal cell carcinoma，BCC)和Bowen病(Bowen’s disease，BD)中的表達(dá)，探討它們?cè)谏鲜銎つw腫瘤發(fā)病中的意義。 方法：選取四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院皮膚病性病研究所病理科2004年至2007年

2、間活檢及手術(shù)切除標(biāo)本的石蠟包埋組織塊，精選其中病變組織較大的(面積超過0.5cm2)組織塊，其中SCC 30例，BCC 21例，BD 20例，另設(shè)10例我所皮膚外科手術(shù)切除的正常皮膚組織作為對(duì)照，共計(jì)81例。所有標(biāo)本均由有經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)師核實(shí)診斷。手工制作組織芯片，對(duì)所有標(biāo)本行COX-2、p53和c-myc的免疫組化Envision法染色。每個(gè)免疫組化染色流程均設(shè)有對(duì)照作為染色質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，陽性對(duì)照采用反復(fù)染色陽性的切片，空白對(duì)照采用PB

3、S代替一抗。采用BH-2型OLYMPUS光學(xué)顯微鏡觀察4個(gè)20×10倍鏡視野下COX-2、p53和c-myc的染色深淺，并按以下標(biāo)準(zhǔn)對(duì)染色深淺評(píng)分：無色為0分，淡黃色為1分，黃色為2分，棕褐色為3分。將上述視野用JVC彩色攝像機(jī)和朗珈Path FBS細(xì)胞學(xué)報(bào)告工作站攝取圖片，應(yīng)用Image-Pro Plus 5.0軟件進(jìn)行陽性細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)，陽性細(xì)胞表現(xiàn)為胞核(c-myc、p53)或胞漿(COX-2)出現(xiàn)淡黃-棕褐色著色，并計(jì)算陽性

4、細(xì)胞率(陽性細(xì)胞率=陽性細(xì)胞數(shù)/細(xì)胞總數(shù))，按照以下標(biāo)準(zhǔn)對(duì)陽性細(xì)胞率評(píng)分：陽性細(xì)胞率≤25％為1分，26％～50％為2分，51％～75％為3分，≥76％為4分。根據(jù)上述兩個(gè)評(píng)分的乘積對(duì)COX-2、p53和c-myc的表達(dá)水平進(jìn)行4等級(jí)半定量分析：0分為陰性(-)，1～4分為弱陽性(±)，5～8分為陽性(+)，9～12分為強(qiáng)陽性(++)。應(yīng)用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，對(duì)陽性率的差異顯著性用X2檢驗(yàn)。 結(jié)果：1.COX

5、-2蛋白在所檢測皮膚腫瘤組織中的陽性率為76.06％(54/71)，明顯高于在正常皮膚組織中的陽性率10％(1/10)(X2=14.65，P<0.01)；其SCC、BCC及BD組織中COX-2蛋白的陽性率分別為80％、71.43％、75％，均明顯高于在正常皮膚組織中的陽性率10％(X2分別為12.84、7.92、8.86，P<0.05)。 2.p53蛋白在所檢測皮膚腫瘤組織中的陽性率為69％(49/71)，明顯高于在正常皮膚組織中的陽性

6、率10％(1/10)(X2=10.55，P<0.01)；其中SCC、BCC及BD組織中p53蛋白的陽性率分別為76.67％、61.9％、65％，均明顯高于在正常皮膚組織中的陽性率10％(X2分別為11.25、5.42、6.04，P<0.05)。3.c-myc蛋白在所檢測皮膚腫瘤組織中的陽性率為62％(44171)，明顯高于在正常皮膚組織中的陽性率20％(2/10)(X2=4.70，P<0.05)；其中SCC及BD組織中c-myc蛋白的陽

7、性率分別為73.33％、70％，均明顯高于在正常皮膚組織中的陽性率20％(X2分別為6.81、4.84，P<0.05)； c-myc蛋白在BCC組織中的陽性率僅為38.1％，僅略高于在正常皮膚組織中的陽性率20％，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析二者表達(dá)的陽性率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(X2=0.36，P>0.05)。4.組織芯片切片平整，樣本分布均勻，基本無組織缺失、移位或折疊等情況，取樣準(zhǔn)確，無效組織少。 結(jié)論：1.COX-2在皮膚SCC、BCC、BD中呈

8、高表達(dá)，COX-2與皮膚SCC、BCC、BD的發(fā)生有一定關(guān)系。2.p53在皮膚SCC、BCC、BD中呈高表達(dá)，p53基因的突變與皮膚SCC、BCC、BD的發(fā)生有一定關(guān)系。3.c-myc在皮膚SCC、BD中呈高表達(dá)，c-myc與皮膚SCC、BD的發(fā)生有一定關(guān)系。c-myc與BCC的發(fā)生無明顯關(guān)系。c-myc有可能作為判定細(xì)胞惡性增殖程度的指標(biāo)之一。4．組織芯片具有減少誤差、高效、經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn)，特別適合于樣本量較大的研究，具有廣泛的應(yīng)用前景。