Cox-2、P53在骨肉瘤中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的：本研究目的在于探討環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2,cox-2)蛋白、mt-P53(mutant type，p53)蛋白在骨肉瘤、骨軟骨瘤組織中的表達(dá)情況。分析兩者在骨肉瘤組織中表達(dá)的差異性及相互關(guān)聯(lián)性。通過(guò)該研究尋找骨肉瘤一種新的潛在標(biāo)記物，進(jìn)一步應(yīng)用于臨床，為骨肉瘤的早期診斷、治療提供理論和指導(dǎo)。 方法：回顧河北醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院骨病科1998-2004年間收治的骨肉瘤患者檔案，篩選臨床、病理資料齊全的

2、骨肉瘤患者手術(shù)后組織石蠟切片40例作為試驗(yàn)組。其中，男性患者24例，女性患者16例，年齡8-38歲(18.68±6.4.7)。篩選河北醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院骨病科同期收治的骨軟骨瘤患者手術(shù)后組織石蠟切片20例作為對(duì)照組。其中，男性患者13例，女性患者7例，年齡9-27歲(17.95±4.77)。以4μm厚度進(jìn)行連續(xù)切片，應(yīng)用免疫組織化學(xué)鏈霉素親生物素-過(guò)氧化物酶法(Streptavidin-biotin-Peroxidase-Comple

3、x，S-P)進(jìn)行染色，嚴(yán)格遵循S-P染色試劑盒說(shuō)明操作，cox-2蛋白染色一抗工作濃度為：1：50，p53蛋白染色一抗?jié)舛葹?：100。染色時(shí)均需微波修復(fù)抗原。光鏡下觀察染色切片，cox-2蛋白染色：以組織胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒者為陽(yáng)性細(xì)胞；P53蛋白染色：以胞核內(nèi)出現(xiàn)界限清晰的棕黃色顆粒者為陽(yáng)性細(xì)胞。隨機(jī)觀察5個(gè)高倍視野，依照陽(yáng)性細(xì)胞所占比例分為：“一”陽(yáng)性細(xì)胞所占比例<5％；“+” 陽(yáng)性細(xì)胞所占比例5％-25％；“++”陽(yáng)性細(xì)

4、胞所占比例26％-50％；“+++"陽(yáng)性細(xì)胞所占比例>50％。分別統(tǒng)計(jì)兩者的陽(yáng)性表達(dá)情況，所得數(shù)據(jù)應(yīng)用SAS v6.12統(tǒng)計(jì)軟件處理，采用chi-square test進(jìn)行x<'2>檢驗(yàn)，α=0.05為水準(zhǔn)，分別統(tǒng)計(jì)兩者在骨肉瘤、骨軟骨瘤組織細(xì)胞中陽(yáng)性表達(dá)的差異性。采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析法檢驗(yàn)兩者在骨肉瘤中陽(yáng)性表達(dá)之間的相關(guān)性，α=0.05為水準(zhǔn)。 結(jié)果：1通過(guò)光鏡下觀察免疫組織化學(xué)染色狀況，40例骨肉瘤組織中27例c

5、ox-2蛋白染色顯示為陽(yáng)性，且多為過(guò)高表達(dá)，陽(yáng)性率為67.5％。20例骨軟骨瘤中僅3例顯示低陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果，陽(yáng)性率為15％。陽(yáng)性染色主要位于腫瘤組織的胞漿中。兩者存在顯著性差異，x<'2>=14.7，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2 mt-P53蛋白于40例骨肉瘤中22例染色顯示為陽(yáng)性結(jié)果，且多為高表達(dá)，陽(yáng)性率為55.0％，陽(yáng)性染色主要位于組織的胞核中。20例骨軟骨瘤中均未顯示陽(yáng)性結(jié)果。兩者存在顯著性差異，x<'2>=17.368

6、，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3 在40例骨肉瘤患者中有18例cox-2蛋白、mt-P53蛋白染色均為陽(yáng)性，有9例染色均為陰性。通過(guò)Spearman等級(jí)相關(guān)分析法檢驗(yàn)兩者在骨肉瘤中陽(yáng)性表達(dá)的相關(guān)性，顯示兩者存在顯著正相關(guān)，r<,s>=0.58， p<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：1經(jīng)本研究證實(shí)，cox-2蛋白在骨肉瘤組織細(xì)胞中多數(shù)呈現(xiàn)過(guò)高陽(yáng)性表達(dá)，在良性腫瘤中少數(shù)呈現(xiàn)低陽(yáng)性表達(dá)，兩者存在顯著性差異，提示cox-2蛋白

7、的過(guò)高表達(dá)與骨肉瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，cox-2有望成為骨肉瘤新的潛在標(biāo)記物。 2 突變型p53(mt-p53)蛋白在良性骨腫瘤中不表達(dá)，mt-p53蛋白僅在骨肉瘤組織細(xì)胞中可被檢測(cè)到，這提示mt-p53基因可能與骨肉瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可作為腫瘤早期診斷和預(yù)后的指標(biāo)。 3 cox-2蛋白、mt-p53蛋白在骨肉瘤中的表達(dá)呈正相關(guān)，提示在骨肉瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中兩者可能存在相互影響、相互協(xié)同作用。臨床上