EGFR及β-catenin在食管鱗癌組織中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、背景和目的：食管癌是一種嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命健康的消化道惡性腫瘤，以鱗狀上皮癌多見(jiàn)，中國(guó)是世界上食管癌的高發(fā)國(guó)家，也是世界上食管癌高死亡率的國(guó)家之一，在我國(guó)占消化道腫瘤死亡的第二位，僅次于胃癌，而中國(guó)北方地區(qū)特別是河南省林州市是中國(guó)乃至世界上食管癌發(fā)病率最高的地區(qū)之一。食管癌的發(fā)生是一個(gè)多因素，多步驟的發(fā)生過(guò)程，預(yù)后之差在于其癌細(xì)胞有較強(qiáng)的增殖能力及侵襲性，即使一些表面生長(zhǎng)緩慢的食管癌也常常伴有深層浸潤(rùn)。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，利用分子生物學(xué)

2、的指標(biāo)判斷預(yù)后、指導(dǎo)綜合治療以及發(fā)展分子生物治療已成為提高惡性腫瘤治療效果的發(fā)展方向。EGFR(epidermal growth factorreceptor，EGFR)屬于Ⅰ型跨膜酪氨酸激酶生長(zhǎng)因子受體，與配體結(jié)合后，可啟動(dòng)其信號(hào)屬于Ⅰ型跨膜酪氨酸激酶生長(zhǎng)因子受體，與配體結(jié)合后，可啟動(dòng)其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)下游一系列的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，最終引起核內(nèi)早期反應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄水平的增加，使細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)化?，F(xiàn)有的研究表明EGFR在腫瘤細(xì)胞的增殖、分化、抗凋亡、腫瘤血管

3、形成及轉(zhuǎn)移等方面起重要作用。β-連環(huán)蛋白(β-catenin，β-cat)是多功能蛋白質(zhì)，既參與E-cad/cat復(fù)合體的形成，在細(xì)胞粘附中發(fā)揮作用，又作為Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路的中心環(huán)節(jié)參與細(xì)胞增殖分化的調(diào)控。研究表明EGFR激活后可調(diào)控E-cad/cat復(fù)合體中的β-catenirl磷酸化導(dǎo)致其從復(fù)合體分離，從而促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移。本實(shí)驗(yàn)探討EGFR和β-catenin在食管鱗癌及癌旁正常組織中的表達(dá)及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系，為評(píng)估預(yù)后、指

4、導(dǎo)治療提供依據(jù)。 材料與方法：1．60例系焦作市第二人民醫(yī)院外科1992年1月至2000年8月手術(shù)切除食管癌標(biāo)本(同一病例包括癌組織、5cm以外的癌旁正常組織)，HE切片病理證實(shí)為鱗癌。其中男性33例，女性27例；年齡35～73歲，平均年齡50歲。高、中、低分化分別為34、12和14例，其中31例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，29例無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。按TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期17例，Ⅱ期12例，Ⅲ期15例，及Ⅳ期16例；按浸潤(rùn)深度分，T<,1> 13例

5、，T<,2> 12例，T<,3> 21例， T<,4> 14例。全部病例術(shù)后進(jìn)行6～18月的隨訪(fǎng)，隨訪(fǎng)結(jié)束時(shí)死亡29例，尚生存31例。 2．應(yīng)用S-P免疫組化法，EGFR、β-catenin濃縮型鼠抗人單克隆抗體、免疫組化試劑盒及DAB試劑盒均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，取厚4μm石蠟切片，常規(guī)脫蠟、水化后，采用電爐加熱煮沸修復(fù)抗原，EGFR、β-catenin單克隆抗體均按1∶100稀釋?zhuān)訮BS代替一抗作陰性對(duì)照，用已證實(shí)EG

6、FR、β-catenin染色陽(yáng)性的食管鱗癌切片作陽(yáng)性對(duì)照。 3．應(yīng)用sPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行x<'2>檢驗(yàn)，Spearman相關(guān)分析，生存分析應(yīng)用Kaplan-Meier，Log-rank test時(shí)序檢驗(yàn)法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。 結(jié)果： 1．EGFR、β-catenin陽(yáng)性定位分布及表達(dá)：(1)EGFR陽(yáng)性顆粒主要位于腫瘤細(xì)胞的胞漿內(nèi)，周?chē)|(zhì)中未見(jiàn)陽(yáng)性染色。癌旁正常組織和癌組織中EGFR陽(yáng)性表達(dá)率分別為18

7、.3％(11/60)和71.7％(43/60)，兩組間相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x<'2>=34.478，P<0.01)。 (2)β-catenin在癌旁正常組織中表達(dá)均位于細(xì)胞膜，胞漿未見(jiàn)明顯的陽(yáng)性信號(hào)，而食管鱗癌組織中呈異常表達(dá)，胞膜表達(dá)減少，出現(xiàn)胞漿或胞核表達(dá)，癌旁正常組織和癌組織中β-catenin陽(yáng)性表達(dá)率分別為91.7％(55/60)和65％(39/60)，兩組間相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x<'2>=12.570，P<0.0

8、1)。 2．EGFR、β-catenin的表達(dá)與食管癌臨床病理特征及預(yù)后的聯(lián)系：(1)在食管鱗癌中隨去分化程度的增高、浸潤(rùn)深度的增加及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，EGFR陽(yáng)性表達(dá)升高，高分化與中、低分化組的陽(yáng)性率分別為57.7％(15/26)，82.4％(28/34)，浸潤(rùn)在未及外膜(T1、T2)與侵及外膜或以外區(qū)域(T3、T4)的陽(yáng)性率分別為48.0％(12/25)，77.1％(27/35)，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性率分別為58.6

9、％(17/29)，83.9％(26/31)，差異均有顯著性(P<0.05)。按TNM分期，Ⅲ、Ⅳ期EGFR陽(yáng)性表達(dá)者28例(90.3％)，顯著高于Ⅰ、Ⅱ期(51.7％，15/29)(P<0.05)。比較18月生存率，EGFR表達(dá)陽(yáng)性組生存率為41.9％(18/43)與EGFR表達(dá)陰性組76.5％(13/17)相比，差異亦有顯著性(P<0.05)。 (2)60例食管鱗癌中，高分化組β-catenin的陽(yáng)性表達(dá)率(88.5％，23/

10、26)明顯高于中、低分化組(47.8％，16/34)(P<0.05)，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性表達(dá)率82.8％(24/29)亦高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組48.4％(15/31)，有顯著性差異(P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ期β-catenin陽(yáng)性表達(dá)率為79.3％(23/29)，Ⅲ、Ⅳ期51.6％(16/31)，兩組相比差異有顯著性(P<0.05)，且β-catenin的陽(yáng)性表達(dá)組18月生存率59.0％(23/39)高于β-catenin的陰性表達(dá)組38.1

11、％(8/21)，差異亦具有顯著性(P<0.05)。在浸潤(rùn)深度方面T1、T2與T3、T4陽(yáng)性表達(dá)率分別56％(14/25)，71.4％(25/35)，差異無(wú)顯著性(P>0.05)。 3．EGFR和β-catenin在食管癌中表達(dá)的相關(guān)性分析：EGFR與β-catenin共同陽(yáng)性表達(dá)者為23例，共同陰性表達(dá)者1例，EGFR表達(dá)陽(yáng)性但β-catenin陰性者20例，EGFR表達(dá)陰性但β-catenin陽(yáng)性者16例，EGFR與β-cat

12、enin表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.384，P=0.002)。 結(jié)論：1．EGFR在食管鱗癌中呈現(xiàn)過(guò)表達(dá)，與TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、18個(gè)月生存率、浸潤(rùn)深度相關(guān)，EGFR過(guò)表達(dá)可能在食管鱗癌的發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移中起重要作用，EGFR過(guò)表達(dá)者預(yù)后差。 2．β-catenin在食管鱗癌中胞膜表達(dá)減少，出現(xiàn)胞漿、胞核異常表達(dá)，與TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、18個(gè)月生存率相關(guān)，和浸潤(rùn)深度無(wú)關(guān)，提示β-catenin