木蘇丸對實(shí)驗(yàn)性肝纖維化的防治、作用機(jī)制研究及臨床觀察.pdf

1、本研究用二甲基亞硝胺誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型，從血清學(xué)、組織學(xué)、分子生物學(xué)等水平系統(tǒng)觀察中藥復(fù)方制劑木蘇丸對大鼠肝纖維化的防治作用及其可能的發(fā)生機(jī)制，并在臨床上觀察木蘇丸對肝硬化患者的治療作用，為抗肝纖維化治療研究和臨床慢性肝病的防治提供新的選擇。 實(shí)驗(yàn)方法： 一、木蘇丸對實(shí)驗(yàn)性肝纖維化的治療研究雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組，模型對照組，木蘇丸組(小、中、大劑量)，鱉甲軟肝片組。造模方法：每周連續(xù)3天，每天腹腔注射二甲基

2、亞硝胺(DMN)溶液1ml/kg體重，共3周。預(yù)防實(shí)驗(yàn)造模同時(shí)每天藥物灌胃；治療實(shí)驗(yàn)于造模結(jié)束后每天藥物灌胃，共4周。觀察各組大鼠血清肝功能指標(biāo)及纖維化指標(biāo)，肝組織切片HE、VG染色觀察大鼠肝臟病理改變，并對肝纖維化程度進(jìn)行分級(jí)，電鏡觀察肝臟超微結(jié)構(gòu)改變，圖像分析儀半定量分析膠原纖維面積，觀察肝組織α-平滑肌肌動(dòng)蛋白表達(dá)。 二、木蘇丸對實(shí)驗(yàn)性肝纖維化影響的作用機(jī)制研究測定血清超氧化物歧化酶、丙二醛變化，免疫組織化學(xué)法測定基質(zhì)金屬

3、蛋白酶-2(MMP-2)，基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑-1表達(dá)(TIMP-1)；RT-PCR法驗(yàn)證MMP-2，TIMP-1mRNA的基因表達(dá)，圖象分析系統(tǒng)進(jìn)行分析。 三、木蘇丸治療肝硬化的臨床觀察肝硬化患者服用木蘇丸治療3個(gè)月。觀察用藥后癥狀、體征變化及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)改變等。 結(jié)論： 1二甲基亞硝胺腹腔注射能成功地誘導(dǎo)SD大鼠肝纖維化模型，具有操作簡便、模型穩(wěn)定等優(yōu)勢。2木蘇丸能明顯改善肝纖維化大鼠的肝功能，預(yù)防治療可降