黃芩苷對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠肺纖維化的作用及機(jī)制探討.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:肺纖維化是一種由多種因素引起的間質(zhì)性肺疾病。它以肺泡上皮細(xì)胞缺失、纖維細(xì)胞異常增殖和細(xì)胞外基質(zhì)異常沉積為特征。肺纖維化的發(fā)病機(jī)制迄今尚未完全闡明,也沒有理想的治療方法。目前認(rèn)為肺纖維化與氧化應(yīng)激所致的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)失衡有關(guān)。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)是主要的促纖維化因子之一,它由肺組織細(xì)胞和多種炎性細(xì)胞產(chǎn)生,可增加細(xì)胞外基質(zhì)的合成并抑制其降解。肌成纖維細(xì)胞增多是肺纖維化形成的另一主要原因。有研究表明,肌成纖維細(xì)

2、胞不僅分泌Ⅰ型膠原蛋白,而且分泌許多細(xì)胞因子,從而參與肺纖維化形成。 黃芩苷是傳統(tǒng)中藥黃芩的主要成分,其具有廣泛的藥理作用,臨床主要用于消炎和抗感染。已有研究發(fā)現(xiàn),黃芩苷在體內(nèi)、外皆有抗脂質(zhì)過氧化作用。例如主要成分為黃芩苷的小柴胡湯就具有抗肝纖維化的作用。但黃芩苷能否通過對(duì)抗肺纖維化初期的脂質(zhì)過氧化損傷減輕肺纖維化,迄今尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。而我室以往研究發(fā)現(xiàn),連續(xù)給予黃芩苷100mg/kg28天,對(duì)博萊霉素引起的大鼠肺纖維化有加重作

3、用。 本研究的目的是觀察不同劑量黃芩苷(Bai)對(duì)博萊霉素-A5(BLM-A5)所致大鼠肺纖維化的影響;并初步探討黃芩苷(Bai)對(duì)大鼠肺纖維化作用的可能機(jī)制。 一、不同劑量黃芩苷對(duì)博萊霉素所致大鼠肺纖維化的影響 目的:通過研究不同劑量黃芩苷對(duì)肺纖維化的作用,探討黃芩苷對(duì)肺纖維化影響的藥理和毒理作用。 方法:將SD(♂)大鼠隨機(jī)分成6組:即BLM-A5+Bai12.5mg組,BLM-A5+Bai25mg組

4、,BLM-A5+Bai50mg組,BLM-A5+Bai100mg組、BLM-A5+NS組和Sham組。在氣管內(nèi)一次性滴注博萊霉素A5(BLM-A5)后,BLM-A5+Bai12.5mg組,BLM-A5+Bai25mg組,BLM-A5+Bai50mg組,BLM-A5+Bai100mg組、BLM-A5+NS組分別連續(xù)給予不同劑量等體積黃芩苷(12.5mg.kg-1.d-1,25mg.kg-1.d-1,50mg.kg-1.d-1,100mg.

5、kg-1.d-1,×28d;ip)和等體積的生理鹽水(NS)。Sham組為對(duì)照組。注入BLM-A5后28天取材。用肺組織羥脯氨酸(HYP)含量和膠原纖維的特殊染色(Masson染色)來檢測(cè)大鼠的肺纖維化程度。 數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示,采用SPSS-11.5統(tǒng)計(jì)軟件包,多個(gè)樣本均數(shù)比較用單因素方差分析(One-WayANOVA),多個(gè)樣本均數(shù)間的兩兩比較用最小顯著差法(LSD);等級(jí)資料的比較用非參數(shù)秩和檢驗(yàn);以P<

6、0.05作為判斷差異顯著性的標(biāo)準(zhǔn)。 二、黃芩苷對(duì)博萊霉素所致大鼠肺纖維化作用機(jī)制初探 目的:研究黃芩苷對(duì)肺纖維化的作用是否與肺損傷、肺內(nèi)TGF-β1含量及肌成纖維細(xì)胞數(shù)量有關(guān)。 方法:根據(jù)第一部分實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,將大鼠隨機(jī)分為4組:BLM-A5+NSgroup、BLM-A5+Bai12.5mggroup、BLM-A5+Bai100mggroup和Sham組。用肺組織切片HE染色和支氣管肺泡灌洗液(BALF)細(xì)胞數(shù)量來

7、觀察肺損傷程度;用出肺血中NO、MDA含量反映肺內(nèi)氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化反應(yīng);用TGF-β1免疫組織化學(xué)陽性信號(hào)反映TGF-β1蛋白表達(dá);用alpha-平滑肌actin蛋白免疫組織化學(xué)陽性信號(hào)鑒定肌成纖維細(xì)胞。 結(jié)論: 1.連續(xù)給予黃芩苷(12.5mg·kg-1·d-1×28d,ip)有防治BLM-A5誘導(dǎo)大鼠肺纖維化的作用。 2.黃芩苷的抗肺纖維化可能機(jī)制是:(1)通過抑制NO的合成,減輕肺損傷;(2)通過下調(diào)T

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