惡性黑色素瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)基因和蛋白表達(dá)譜.pdf

1、四川大學(xué)博士學(xué)位論文惡性黑色素瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)基因和蛋白表達(dá)譜姓名：王玉芳申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：王樹人20040501惡性黑色素瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)基因蛋白質(zhì)表達(dá)譜四川大學(xué)博士生學(xué)位論文響并采用WesternBlot檢測caspases及凋亡相關(guān)蛋白在惡性黑色素瘤細(xì)胞株中的表達(dá)情況。結(jié)果:從獲得的四株惡性黑色素瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)譜來看:(1)Bcl2家族成員BaxMcl1BelXL、Bar和Nip3呈陽性信號(

2、2)凋亡抑制蛋白家族成員CIAPI和ApollonBruce表達(dá)陽性(3)癌基因MDM2以及細(xì)胞周期檢控點基因HUS1在惡性黑色素瘤細(xì)胞中表達(dá)呈陽性:(4)TNF受體家族HVEM1TNFR2p75和LTbR呈陽性表達(dá)(5)caspase14在惡性色素瘤細(xì)胞、組織和正常黑素細(xì)胞、皮內(nèi)痣中都有表達(dá)。而且MART1高表達(dá)的細(xì)胞株A375M14和SKMel1中表達(dá)水平高于MARTI低表達(dá)的細(xì)胞株A875和正常黑素細(xì)胞，在腫瘤組織中的表達(dá)高于皮內(nèi)

3、痣。以MARTI表達(dá)水平為標(biāo)準(zhǔn)，將惡性黑色素瘤細(xì)胞系分為MARTI高表達(dá)細(xì)胞系，包括A875M14SKMel1和MARTI低表達(dá)細(xì)胞系A(chǔ)875。通過測定不同抗癌藥物和Uv刺激對細(xì)胞增殖活力的影響，發(fā)現(xiàn)MART1低表達(dá)的細(xì)胞株對處理因素較MARTI高表達(dá)細(xì)胞株更加敏感。進(jìn)一步通過WesternBlot方法檢測了caspase以及凋亡相關(guān)蛋白質(zhì)在兩大類惡性黑色素瘤細(xì)胞與人正常黑素細(xì)胞的表達(dá)。結(jié)果顯示:(1)MARTI高表達(dá)的細(xì)胞中凋亡抑制蛋

4、白質(zhì)MLIALBcl2在表達(dá)顯著高于MART1低表達(dá)的細(xì)胞，也高于正常黑素細(xì)胞(2)凋亡抑制蛋白質(zhì)cIAPIcIAP2和survivin的表達(dá)在MART1低表達(dá)的細(xì)胞中低于正常黑素細(xì)胞和MART1高表達(dá)的細(xì)胞，在正常黑素細(xì)胞和MARTI高表達(dá)的細(xì)胞無顯著差別:(3)促凋亡蛋白質(zhì)SMAC在惡性黑色素瘤細(xì)胞中表達(dá)較正常黑素細(xì)胞降低(4)在惡性黑色素瘤細(xì)胞與人正常黑素細(xì)胞均未檢測到caspase67810的表達(dá)而caspase39表達(dá)在MAR