柑橘果肉線粒體分離及果皮精油組分分析.pdf

1、作為柑橘生產大國，我國柑橘的主要栽培品種多以鮮食為主。隨著社會經濟的高速發(fā)展，消費者對柑橘果實的內在與外觀品質均提出了更高的要求。柑橘果實的內在品質主要包括:柑橘果實的風味，營養(yǎng)成分，糖酸的含量等;外觀品質主要包括果實的形狀，果形指數(shù)，果實色澤等。果實采摘后，其自身的營養(yǎng)供給立刻被切斷，果實衰老相關的一些生理、生化指標發(fā)生顯著的改變，進而導致柑橘果實品質發(fā)生劣變。作為動植物細胞中的一種重要的細胞器，線粒體直接參與細胞衰老。線粒體的形態(tài)和

2、生理狀態(tài)與柑橘果實采后生物學特性關系密切，但在柑橘果實中尚未開展系統(tǒng)的研究，因此，分離柑橘果肉組織的線粒體是深入開展果實內在品質變化研究的重要前提條件。另一方面，油斑病(Oleocellosis)是柑橘采后一種十分常見的生理性病害，會嚴重降低果實的外觀品質，但其發(fā)病機理尚不明確，通常認為與果皮油胞破裂和精油外滲有關，但還缺乏實驗證據的支持。為此，本研究分別以“國慶一號”溫州蜜柑（Citrus unshiu“Guoqing No.1”）和

3、伏令夏橙(Citrus sinensis Osbeck)為主要實驗材料摸索果肉組織線粒體分離的技術體系，以溫州蜜柑、紐荷爾臍橙和早紅臍橙為研究材料，探究精油成分的差異與油斑病的關系。主要結果如下:
　　1、線粒體分離緩沖液的蔗糖濃度因品種不同而不同，溫州蜜柑最適合的蔗糖濃度為0.5 M，而夏橙為0.4 M。通過一次Nycodenz不連續(xù)密度梯度離心，線粒體出現(xiàn)在14％和21％的密度梯度界面處。線粒體分離產物Western Blot

4、分析結果表明，通過該方法分離的線粒體基本是完整的，基本不含有有色體，過氧化物酶體，細胞質的污染，但是液泡的污染較嚴重。
　　2、針對溫州蜜柑、紐荷爾臍橙、早紅臍橙這三個品種柑橘四個生長發(fā)育時期的精油成分進行分析。不同時期之間和不同品種之間的比較結果表明，在早紅臍橙的四個生長發(fā)育時期中，γ-萜烯、異松油烯、β-芳樟醇、香茅醛、橙花醛、紫蘇醛、α-石竹烯在早紅臍橙轉色期顯著上調積累;而在轉色期的溫州蜜柑、紐荷爾臍橙、早紅臍橙精油中，香

5、檜烯，月桂烯，β-芳樟醇，橙花醛，香葉醛，β-蓽澄茄油烯，β-法呢烯，(Z，E)-α-法呢烯，1-辛醇，辛醛，壬醛，癸醛，十二醛在轉色期的早紅臍橙精油中顯著上調積累。
　　3、使用轉色期的早紅精油涂抹轉色前后的溫州蜜柑果面的結果表明，轉色前的溫州蜜柑對精油的敏感程度更高，具體表現(xiàn)在油斑病的病斑面積更大，褐變更嚴重。紫外燈照射油斑病病斑部位的結果也表明，油斑病病斑部位在紫外燈的照射下會顯現(xiàn)出黃色的熒光。冰凍切片的結果表明，油斑病發(fā)病