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1、光療法是指用人工光源或者是日光輻射對(duì)身體發(fā)病區(qū)域進(jìn)行輻照,從而達(dá)到治療疾病目的的一種醫(yī)療手段。光療法具有創(chuàng)傷小、疼痛度低、恢復(fù)快等優(yōu)點(diǎn),因此發(fā)展十分迅速。長(zhǎng)波紫外線(UVA)對(duì)地球上的生物起著十分重要的作用,研究表明長(zhǎng)波紫外線直接輻照細(xì)胞或者與其它藥物相結(jié)合輻照細(xì)胞能夠使細(xì)胞產(chǎn)生凋亡因子或炎癥因子,從而引起細(xì)胞凋亡或者壞死,其在治療白癜風(fēng)、腫瘤等疾病中應(yīng)用廣泛??梢?jiàn)光輻照細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中活性氧的含量增加、鈣濃度升高,而鈣濃度的改變是光
2、生物刺激效應(yīng)中一個(gè)重要的信號(hào),可以傳導(dǎo)和激活多種細(xì)胞通路,可見(jiàn)光主要應(yīng)用在治療面神經(jīng)炎、白細(xì)胞減少等疾病中。光療法雖然在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用已經(jīng)十分廣泛,但劑量使用、輻照方式等方面研究尚不充足,本文希望在細(xì)胞水平探究光療法的機(jī)制以及治療中劑量的選擇。
為了實(shí)現(xiàn)定時(shí)、定點(diǎn)、可觀測(cè)的輻照細(xì)胞,本文搭建了兩個(gè)光路系統(tǒng)。一個(gè)是基于倒置熒光顯微鏡搭建的波長(zhǎng)為532 nm的激光輻照系統(tǒng)。激光通過(guò)顯微鏡物鏡聚焦輻照細(xì)胞,光路中設(shè)置的視場(chǎng)光闌可以調(diào)控
3、輻照光斑的大小。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示532 nm激光輻照細(xì)胞并不能直接使滑膜細(xì)胞壞死。另一個(gè)是基于倒置熒光顯微鏡的高壓汞燈輻照系統(tǒng),能夠提供200 nm-400 nm波段的紫外輻照。在該系統(tǒng)中,汞燈光源也是通過(guò)顯微鏡的物鏡聚焦輻照細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),365 nm長(zhǎng)波紫外光輻照Hela細(xì)胞致死劑量具有強(qiáng)度依賴性。1 W/cm2強(qiáng)度輻照,細(xì)胞壞死劑量窗口在200 J/cm2左右;0.5 W/cm2強(qiáng)度輻照,細(xì)胞壞死劑量窗口在160J/cm2左右;0.1
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