重組人生長激素對梗阻性黃疸大鼠肝切除術(shù)后肝功能及肝再生影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、重組人生長激素對梗阻性黃疸大鼠肝切除術(shù)后肝功能及肝再生影響的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的：
　　探討重組人生長激素對梗阻性黃疸大鼠肝切除術(shù)后肝功能和肝再生的影響，提供重組人生長激素臨床應(yīng)用的理論依據(jù)。
　　材料與方法：
　　1.動物分組：健康雄性SD大鼠72只（購自長沙市開福區(qū)湘品生物有限責(zé)任公司），體重320±20g，飼養(yǎng)清潔環(huán)境，術(shù)前及術(shù)后均自由進(jìn)食水，12小時(shí)晝夜規(guī)律生活。大鼠隨機(jī)分為4組：1. SN(SO-NS)組

2、：假手術(shù)肝切除NS注射組2. SG(SO-rhGH)組：假手術(shù)肝切除rhGH注射組3. ON(OJ-NS)組：梗阻性黃疸左肝小葉切除NS注射組4.OG(OJ-rhGH)組：梗阻性黃疸左肝小葉切除rhGH注射組。
　　2.動物模型制備：
　　（1）SN組、SG組：10％水合氯醛按0.3ml/kg腹腔注射麻醉，取仰臥位，四肢固定，腹部備皮，碘伏消毒，鋪洞巾，腹正中白線進(jìn)腹，找到膽總管，予以翻動第一肝門后關(guān)腹。5天后，游離左肝小葉

3、，予以結(jié)扎左肝肝蒂切肝，行膽道外引流后關(guān)腹。SN組予以每日皮下注射1ml/kg生理鹽水，SG組予以每日皮下注射1ml/kg重組人生長激素。
　　（2）ON組、OG組：10%水合氯醛按0.3ml/kg腹腔注射麻醉，取仰臥位，四肢固定，腹部備皮，碘伏消毒，鋪洞巾，腹正中白線進(jìn)腹，找到膽總管，予以0＃絲線結(jié)扎后關(guān)腹。5天后，游離左肝小葉，予以結(jié)扎切肝，在已接扎的膽總管平面上3mm行膽道外引流后關(guān)腹。SN組予以每日皮下注射1ml/kg生理

4、鹽水，SG組予以每日皮下注射1ml/kg重組人生長激素。
　　3.指標(biāo)檢測：各時(shí)相6只SD大鼠，各組分別在術(shù)后24h、72h、120h時(shí)間點(diǎn)處死大鼠，利用術(shù)后殘肝重量和大鼠體重測定肝再生率；應(yīng)用全自動生化分析儀檢測血清總膽紅素（TIBL）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(AST)、白蛋白(ALB)；殘肝行HE染色，光鏡下觀察肝組織的有絲分裂情況，統(tǒng)計(jì)有絲分裂細(xì)胞數(shù)，即核分裂指數(shù)；免疫組化染色檢測PCNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.大鼠術(shù)

5、后肝功能測定
　　未行梗阻性黃疸的大鼠行肝切除，術(shù)后第24h、72h、120h，SG組比 SN組ALT下降快，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義；術(shù)后第24h、72h，SG組比SN組ALB高，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義。而對于膽道梗阻后的大鼠行部分肝切除，術(shù)后第72h、120h,SG組比SN組TBIL下降快，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義；術(shù)后24h、72h、120h,SG組比SN組ALT低，ALB升高，P<0.05，差異有

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義。
　　2.大鼠術(shù)后肝再生功能評價(jià)
　　SG組對比SN組在術(shù)后第24h、72h、120h的肝再生率、肝細(xì)胞核分裂相高， P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義；SN組比ON組在術(shù)后24h、72h、120h肝再生率、肝細(xì)胞核分裂相高，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義；OG組比ON組在術(shù)后第24h、72h、120h的肝再生率、肝細(xì)胞核分裂相高，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義；OG組比SG組在術(shù)后第24h、72h、120h

7、，肝再生率、肝細(xì)胞核分裂相低，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義；
　　另外對于免疫組化PCNA研究中我們發(fā)現(xiàn)，在未梗阻的部分肝切除術(shù)SN組、SG組的肝再生率、肝細(xì)胞核分裂相、PCNA高峰出現(xiàn)于術(shù)后第24h，而梗阻性部分肝切除術(shù)ON組、OG組肝再生率、肝細(xì)胞核分裂相、PCNA高峰出現(xiàn)于術(shù)后第72h。對于相同時(shí)間點(diǎn)，SG組PCNA數(shù)多于SN組，OG組PCNA組數(shù)多于ON組。而對于相同時(shí)間點(diǎn)的ON組PCNA數(shù)少于SN組，OG組PCNA組