小葉黃楊抗心肌細(xì)胞氧化損傷有效組分與質(zhì)量控制研究.pdf

1、目的: 明確小葉黃楊的抗心肌氧化損傷有效組分及其藥用物質(zhì)基礎(chǔ)，建立藥材的質(zhì)量控制方法。
　　方法: 將小葉黃楊藥材粉末用75％乙醇提取得醇提物，剩余藥渣再用水提醇沉和 Sevage除蛋白得水提物；乙醇粗提物用pH=3酸水溶散，先乙酸乙酯(A)萃取，后將水層液堿化至pH=9，再用氯仿(B)和正丁醇(C)依次萃取，分別得到組分A、B和C以及水組分D；藥渣水提物再用水提醇沉法和Sevag試劑除蛋白得到粗多糖組分E；對(duì)獲得的5個(gè)組分進(jìn)行抗

2、過氧化氫誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞氧化損傷試驗(yàn)，篩選出小葉黃楊的抗心肌細(xì)胞氧化損傷有效組分；利用各種現(xiàn)代和經(jīng)典色譜分離手段對(duì)小葉黃楊各個(gè)制備組分進(jìn)行系統(tǒng)的分離、純化，根據(jù)單體化合物的相關(guān)理化性質(zhì)和波譜特征數(shù)據(jù)對(duì)其結(jié)構(gòu)解析與鑒定，進(jìn)一步的明確小葉黃楊物質(zhì)基礎(chǔ)以及有效組分的化學(xué)成分。以有效組分及其主要成分的含量為對(duì)象，進(jìn)行藥材的質(zhì)量控制研究，并采用聚類分析法對(duì)含量測(cè)定和指紋圖譜研究結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果: 實(shí)驗(yàn)證實(shí)氯仿組分(B)為小

3、葉黃楊的抗心肌細(xì)胞氧化損傷有效組分，其具有明顯的保護(hù)心肌細(xì)胞活性。分別從乙酸乙酯組分、氯仿組分、正丁醇組分共分離得到了19個(gè)化合物，鑒定了其中16個(gè)化合物：4′,5-二羥基-3,3′,6,7-四甲氧基黃酮(1)，4′,5-二羥基-3,6,7-三甲氧基黃酮(2)，3′,4′,5-三羥基-3,6,7-三甲氧基黃酮(3)，松脂素(4)，3′-O-去甲基表松脂素(5)，阿魏酸甲酯(6)，對(duì)羥基肉桂酸甲酯(7)，黃花菜木脂素A(8)，紫丁香苷(9

4、)，異落葉松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷(10)，(+)-buxaquamarine(11)，(-)-16α-hydro xybuxaminone(12)，buxaminone(13)，cyclobuxoviridine(14)，moenjodaramine(15)，3,6,7-三甲基-5,3′-二羥基黃酮醇-4′-(β-D-呋喃木糖-(1′′′→6′′)-β-D-吡喃葡萄糖苷（小葉黃楊苷）(16)；對(duì)分離得到單體化合物進(jìn)行對(duì)照品篩選

5、研究，獲得了純度和含量均較高的對(duì)照品環(huán)黃楊酮堿（cyclobuxoviridine），并以這個(gè)對(duì)照品化合物為指標(biāo)，對(duì)16批小葉黃楊藥材進(jìn)行了指紋圖譜和含量測(cè)定。根據(jù)測(cè)定結(jié)果，建議小葉黃楊藥材內(nèi)環(huán)黃楊酮堿含量不得少于0.012%。
　　結(jié)論: 在已鑒定的化合物中，化合物3,6,7-三甲基-5,3′-二羥基黃酮醇-4′-(β-D-呋喃木糖-(1′′′→6′′)-β-D-吡喃葡萄糖苷(16)為新化合物，將其命名為小葉黃楊苷；其余4′,5

6、-二羥基-3,3′,6,7-四甲氧基黃酮(1)，松脂素(4),3′-O-去甲基表松脂素(5),阿魏酸甲酯(6),對(duì)羥基肉桂酸甲酯(7),紫丁香苷(8),異落葉松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷(10),(+)-buxaquamarine(11)，(-)-16α-hydroxybuxaminone(12),Buxaminone(13),cyclobuxoviridine(14),moenjodara mine(15)，共13個(gè)化合物均為該植