前列腺素對(duì)妊娠子宮肌炎性因子生成和收縮相關(guān)蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、胚胎的植入，妊娠的維持以及分娩的發(fā)生等一系列過(guò)程都與母胎界面免疫反應(yīng)密切相關(guān)。研究表明，分娩啟動(dòng)與宮內(nèi)局部炎癥微環(huán)境的改變有關(guān)，炎性因子可調(diào)控子宮肌組織收縮相關(guān)蛋白等表達(dá)，而使子宮肌收縮活性的發(fā)生改變，從而啟動(dòng)分娩。但是子宮局部炎癥微環(huán)境的調(diào)控機(jī)制，目前尚不清楚。前列腺素F2α一直被認(rèn)為是有效的宮縮激動(dòng)劑，但應(yīng)用在臨床引產(chǎn)卻通常需要數(shù)小時(shí)的延遲作用時(shí)間，提示了其對(duì)子宮肌收縮力的調(diào)控機(jī)制可能先參與了子宮肌的激活過(guò)程，而后再刺激子宮產(chǎn)生規(guī)律

2、收縮。有研究報(bào)道分娩啟動(dòng)前孕婦羊水中PGs水平顯著升高，且分娩啟動(dòng)后并沒(méi)有進(jìn)一步升高，這提示了前列腺素很可能參與了分娩啟動(dòng)前子宮肌的激活，因此在本課題的第一部分，我們以原代培養(yǎng)子宮平滑肌細(xì)胞為研究模型，研究了子宮內(nèi)二種主要的前列腺素——PGF2α及PGE2是否調(diào)節(jié)妊娠子宮肌細(xì)胞炎性因子的生成，進(jìn)而影響宮內(nèi)炎癥微環(huán)境的改變。
　　 妊娠期間子宮肌的功能狀態(tài)呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)變化，即在大部分時(shí)間內(nèi)其處于靜息，在妊娠末期時(shí)出現(xiàn)規(guī)律性的收縮。子宮

3、肌從靜息轉(zhuǎn)化為收縮是與子宮肌組織與收縮相關(guān)蛋白表達(dá)水平有關(guān)。前列腺素是否具有直接調(diào)節(jié)子宮肌收縮相關(guān)表達(dá)的作用，尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。因此，本課題的第二部分，我們對(duì)以PTGS-2，OTR，CX43以及PTGFR四種蛋白作為UAPs家族的代表，研究了PGF2α及PGE2是否可能通過(guò)調(diào)節(jié)這些蛋白的表達(dá)而參與了子宮肌的激活過(guò)程。
　　 此外，轉(zhuǎn)錄因子與其下游靶基因的表達(dá)密切相關(guān)，其直接結(jié)合于靶基因啟動(dòng)子區(qū)域，從而影響了靶基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程。鋅指E

4、盒結(jié)合同源盒蛋白(ZEB)作為一轉(zhuǎn)錄抑制因子，已被證實(shí)參與了收縮相關(guān)蛋白CX43，OTR等的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。那么在分娩啟動(dòng)前期，是否收到前列腺素的調(diào)控目前還未見(jiàn)明確報(bào)道。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　 一、PGs通過(guò)不同受體對(duì)妊娠子宮平滑肌細(xì)胞上炎癥因子生成的調(diào)節(jié)作用
　　 1.在分娩啟動(dòng)前期子宮肌激活的過(guò)程中，PGF2α可刺激促炎因子IL-6，IL-1β，趨化因子IL-8，MCP-1，以及生長(zhǎng)因子VEGF的表達(dá)上調(diào);但

5、抑制了TNFα的生成。
　　 2.PGF2α-PTGFR激活的胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，主要由PLC-PKC通路上調(diào)子宮平滑肌細(xì)胞中IL-6，IL-1β，IL-8，MCP-1，VEGF的生成，同時(shí)抑制了TNFα的生成;而Calcineurin-NFAT通路的激活則介導(dǎo)了對(duì)MCP-1以及TNFα的生成;P38-STATs通路主要參與了對(duì)MCP-1生成的調(diào)節(jié)，PI3K通路則可能調(diào)節(jié)MCP-1和VEGF的生成。
　　 3.PGE2通過(guò)

6、EP1/3上調(diào)IL-6，VEGF，TNF的生成，但同時(shí)減少了IL-1β的生成;通過(guò)EP2上調(diào)IL-6，IL-8，IL-1β以及VEGF的生成，在低濃度時(shí)促進(jìn)TNFα的生成，在高濃度時(shí)抑制其生成;通過(guò)EP4主要下調(diào)了VEGF的生成，同時(shí)上調(diào)IL-1β以及TNFα的生成。PGE2對(duì)趨化因子MCP-1并未見(jiàn)明顯的調(diào)節(jié)作用。
　　 4.PGF2α以及PGE2均參與分娩前期炎癥相關(guān)因子的生成，一方面通過(guò)促進(jìn)促炎因子的生成創(chuàng)造了分娩啟動(dòng)前期

7、子宮局部炎癥微環(huán)境的建立，同時(shí)刺激子宮平滑肌分泌的趨化因子對(duì)于白細(xì)胞向?qū)m內(nèi)的招募富集，進(jìn)一步擴(kuò)大炎癥反應(yīng)的進(jìn)行提供了有利條件。
　　 二、PGs通過(guò)不同受體對(duì)妊娠子宮平滑肌細(xì)胞上子宮收縮相關(guān)蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)作用
　　 1.前列腺素F2α通過(guò)激活Gq蛋白，經(jīng)胞內(nèi)一系列信號(hào)分子P38，PI3K和PLC-β-PKC等的傳遞，介導(dǎo)了對(duì)子宮收縮相關(guān)蛋白CX43，PTGS-2以及OTR表達(dá)的上調(diào)作用，而同時(shí)以負(fù)反饋調(diào)節(jié)的方式降低了自身

8、受體的表達(dá)。
　　 2.PGE2則分別通過(guò)收縮性受體EP1/3上調(diào)了CX43，PTGS-2，OTR以及PTGFR的表達(dá)，而舒張性受體EP2則通過(guò)抑制OTR以及PTGFR的表達(dá)降低子宮平滑肌對(duì)催產(chǎn)素和前列腺素等宮縮劑的敏感性。通過(guò)兩類(lèi)受體亞型的相互協(xié)調(diào)作用，完成對(duì)收縮相關(guān)蛋白的表達(dá)的精細(xì)調(diào)節(jié)。
　　 三、PGs通過(guò)不同受體對(duì)妊娠子宮平滑肌細(xì)胞上轉(zhuǎn)錄因子ZEBs的調(diào)節(jié)作用
　　 1.PGF2α可劑量依賴(lài)性減少ZEB兩

9、種亞型蛋白水平的表達(dá)。
　　 2.PGE2主要是發(fā)揮著下調(diào)ZEB1的調(diào)節(jié)作用，但是其通過(guò)EP1/3可上調(diào)ZEB1和ZEB2;通過(guò)EP2和EP4下調(diào)ZEB1以及ZEB2的蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)論:
　　 本研究表明，臨近分娩時(shí)孕婦羊水中高表達(dá)的前列腺素PGF2α及PGE2在子宮肌局部通過(guò)自分泌或旁分泌的方式，一方面可通過(guò)促進(jìn)炎癥相關(guān)的促炎因子及子的表達(dá)，參與構(gòu)建宮內(nèi)局部炎癥微環(huán)境，同時(shí)也通過(guò)上調(diào)VEGF的表達(dá)改變子宮