乏氧誘導因子-1α與食管鱗癌血管生成和化療療效的關系及其機制.pdf

1、鄭州大學博士學位論文乏氧誘導因子-1α與食管鱗癌血管生成和化療療效的關系及其機制姓名：吳欣愛申請學位級別：博士專業(yè)：腫瘤學指導教師：孫燕;樊青霞20070501鄭州大學2 0 0 7 年博士畢業(yè)論文 中文摘要系，本文采用半定量聚合酶鏈反應技術及免疫組化技術檢測食管鱗癌組織中H I F ．1 a 在m R N A 水平及蛋白水平的表達，采用免疫組化技術檢測食管鱗癌組織中V E G F 、C D 3 4 的表達，觀察了H I F —l a

2、在食管癌中的表達情況及其與臨床病理特征、V E G F 和微血管密度的關系。為了探討H I F ．1 a 是否通過上調(diào)V E G F 的表達而促進食管癌血管生成的機制，本文以食管鱗癌細胞株E C 9 7 0 6 為研究對象，通過化學性乏氧誘導劑氯化鈷( c o b a l t c h l o r i d e ，C o C l 2 ) 建立乏氧模型，體外模擬腫瘤乏氧微環(huán)境。采用半定量R T - P C R 、W e s t e m - b

3、 l o t 、免疫細胞化學技術檢測乏氧誘導的H I F —l a 、V E G F 表達情況。進一步利用R N A 干擾技術( R N A i n t e f e r c n c e ,R N A i ) 觀察小干擾R N A ( s m a l li n t e r f e r e n c eR N A ，s i R N A ) 轉染E C 9 7 0 6 細胞后乏氧誘導的H I F ．1 c t 和V E G F 的表達的改變，初

4、步探討了H I F —l a 在乏氧條件下對食管癌血管生成的調(diào)控作用及其機制以及以H I F ．1 a 為靶點抗食管癌血管生成治療的可能性。為探討H I F ．1 a 是否與食管癌化療耐藥有關及其參與耐藥的機制，采用免疫組化技術檢測食管鱗癌組織中H I F —l a 的表達，并與臨床化療療效相結合，探討H I F ．1 a 與食管癌化療療效的關系。從體外方面，以E C 9 7 0 6 為研究對象，通過化學性乏氧誘導劑建立乏氧模型，采用M

5、 T S 、半定量R T - P C R 、免疫細胞化學、R N A干擾技術進一步從多藥耐藥、凋亡、細胞周期等方面，探討了H I F 。l a 參與食管癌細胞乏氧條件下對不同機制的化療藥物產(chǎn)生耐藥的機制。并進一步體外探討以H I F ．1 a 為新的靶點，應用R N A 干擾技術逆轉食管癌耐藥的新途徑。為以此為突破口進一步提高食管癌的化療水平提供理論依據(jù)。第一部分乏氧誘導因子．1 a 在食管鱗癌組織中的表達及乏氧調(diào)節(jié)方法1 ．應用半定量