胰島素抵抗與非酒精性脂肪肝的相關性及其部分機制的研究.pdf

1、研究目的：旨在通過對目標人群的體檢資料、血清指標、人體成分的分析,以及人正常肝細胞L02的體外培養(yǎng),研究機體在IR狀態(tài)下與脂質(zhì)血癥與肝臟損傷的關系,對比不同胰島素水平的刺激所造成的肝臟細胞PGC-1α表達水平的變化,以及PGC-1α的表達失衡所致肝臟細胞能量代謝異常、肝臟線粒體損傷,及與肝脂肪堆積關系,有助于進一步闡明NAFLD的發(fā)病機制,從而提供一定的數(shù)據(jù)基礎和實驗依據(jù)。
　　研究方法：本次研究對象選擇某大學附屬醫(yī)院的體檢人群,

2、內(nèi)容包括病史采集、體格檢查、生化指標的檢測、肝臟彩超檢查。將研究對象分為NAFLD組和對照組,分析兩組的一般情況,生化指標的比較,代謝綜合征(metabolicsyndrome,MS)及其組分的患病率,NAFLD組的危險因素以及NAFLD組的體脂、血脂與IR指標的相關分析。再進一步通過高濃度胰島素誘導L02細胞建立IR模型;用透射電子顯微鏡(transmissionelectronmicroscope,TEM)觀察未加胰島素和胰島素誘導

3、組下的肝細胞的超微結(jié)構(gòu)變化;取未加胰島素和胰島素誘導組下的人肝細胞系L02細胞用于RT-PCR半定量方法測定PGC-1αmRNA表達水平。
　　結(jié)果：
　　1、NAFLD組較對照組的SBP、DBP、FBS、TC、TG、HDL-C、LDL-C、ALT、AST、UA、FFA、FINS、BMI、WC、WHR、VFA、HOMA-IR及體脂百分比增高,具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　2、NAFLD組MS及其組分(肥胖癥、高

4、TG血癥、低HDL-C血癥、血壓增高、FBS異常)的患病率均較對照組高,有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　3、NAFLD組FINS與TG、FFA、BMI、WC呈正相關(P<0.05,P<0.01),FINS與與HDL-C呈負相關(P<0.01)。NAFLD組HOMA-IR與TG、FFA、BMI、WC、WHR呈正相關(P<0.05,P<0.01),HOMA-IR與HDL-C呈負相關(P<0.01)。
　　4、以正常人肝細胞系

5、L02細胞提取得到的總RNA為模板,非特異擴增出PGC-1α基因和β-actin基因,目的條帶大小分別約為247bp和100bp。胰島素組均較對照組數(shù)值PGC-1αmRNA增高,且胰島素E組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　5、電鏡下觀察顯示:對照組即未加胰島素組,可見細胞形態(tài)大小不一,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈軌道樣排列,線粒體小而多,嵴較完整,少見脂滴出現(xiàn)。胰島素誘導組隨著濃度加大,可見脂滴逐漸積累,細胞線粒體的數(shù)量減少、結(jié)構(gòu)不清,嵴