頜骨骨纖維異常增殖癥及骨化性纖維瘤一氧化氮合酶的表達及病因探討.pdf

1、一氧化氮(nitric oxide，NO)作為一種多效的信號分子參與調(diào)節(jié)人體內(nèi)多種細胞的功能，其生物合成主要受一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)的調(diào)節(jié)。骨組織中存在著人類三種NOS亞型，即神經(jīng)元NOS(nNOS)，內(nèi)皮型NOS(eNOS)，誘導(dǎo)型NOS(iNOS)。雖然各亞型擁有相同的催化活性，但編碼它們的基因各不相同，在各種組織中的分布也不相同，說明它們的功能也不盡相同。各亞型在成骨細胞、破骨細胞中的不

2、同表達不僅可以反應(yīng)出骨組織的生長狀況，同時也對骨組織的正常生長發(fā)育和代謝平衡有著重要的影響作用。 目前許多研究正試圖闡明各亞型在生理、病理狀態(tài)下對骨組織的影響。早期有學(xué)者將分離出的成骨細胞和破骨細胞分別加以培養(yǎng)，并在培養(yǎng)基中加入各種成份來觀察成骨細胞、破骨細胞的活動，分別測定各NOS亞型在兩種骨細胞上的表達，推測其作用。近期有學(xué)者利用靶向斷裂NOS基因，來研究各NOS亞型對大鼠骨發(fā)育的影響，檢測大鼠骨的變化，以了解各NOS亞型在

3、生物體內(nèi)的作用。還有學(xué)者通過測定人類骨疾病中各NOS亞型的表達及NO供體、NOS抑制劑對骨的生長狀況的影響，來推測NOS各亞型對人類骨細胞的作用。但到目前為止，NOS各亞型對骨細胞的作用在很多研究中仍存在著矛盾，其作用機理仍未能完全弄清，觀測NOS在各種骨疾病中的表達仍是了解其功能的重要途徑。 骨纖維異常增殖癥(Fibrous dysplasia of bone，F(xiàn)D)是一種骨髓和網(wǎng)狀骨被纖維結(jié)締組織和不規(guī)則病變所代替的骨纖維性

4、疾病，常于青少年時期發(fā)病，病程發(fā)展緩慢。有些患者青春期后可停止發(fā)展，但也可終身緩慢進行。病損處與正常骨無明顯分界。骨祖細胞向成骨細胞轉(zhuǎn)化受阻是FD形成的主要原因。骨化性纖維瘤(OSSifying fibroma of bone，oF)是一種真性腫瘤，病因尚不清楚，常發(fā)生于幼童，病損處與正常組織有明顯的邊界。 FD與OF比較，兩種病變均存在骨的結(jié)構(gòu)及形態(tài)改變，在組織病理學(xué)上，兩者都是纖維間質(zhì)中有不規(guī)則的骨小梁形成。不同的是，F(xiàn)D是

5、纖維性骨，不形成板狀骨，同時骨小梁呈多形態(tài)，在小梁邊緣無骨母細胞和破骨細胞。O F的骨小梁有板狀骨形成，小梁邊緣有骨母細胞被覆及不等量的破骨細胞，目前多數(shù)學(xué)者認為FD和OF二者均為纖維——骨病變，均屬骨發(fā)育障礙，這是否與骨發(fā)育障礙的程度、阻滯的階段不同有關(guān)，尚須證實。 OF與FD在臨床表現(xiàn)和病理特征方面有許多相似與不同之處，比較兩種疾病病損骨中NOS三種亞型在成骨細胞(骨母細胞)與破骨細胞內(nèi)表達的不同，有利于進一步了解NOS各亞

6、型對骨細胞的作用，也為尋找FD與OF的發(fā)病機制及治療方法提供可能。目前這方面的研究情況國內(nèi)外尚未見報道。 目的：本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測NOS三種亞型在FD與OF病變組織中成骨細胞(骨母細胞)、破骨細胞上的表達情況，探索NOS各亞型對骨細胞的分化、骨的代謝的影響，尋找NOS在骨代謝平衡中的作用；為了解FD與OF的發(fā)病機制及為尋找治療FD與OF的新方法提供理論依據(jù)。 方法：標本主要來源于中山醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院病理科保

7、存、外科手術(shù)切除的頜面部OF及FD組織石蠟包埋標本，其中OFl4例，F(xiàn)D20例。用SP免疫組織化學(xué)染色法檢測OF和FD中的成骨細胞、破骨細胞、纖維母細胞中NOS三亞型的表達。陽性染色定位于細胞漿，呈棕黃色。本研究結(jié)果均為計數(shù)資料，對所得數(shù)據(jù)進行四格表資料的卡方檢驗，P<0.05為差異有顯著性，P<0.01為差異有明顯顯著性。 結(jié)果：①eNOS在OF、FD中的表達14例OF和20例FD中eNOS在骨母細胞、破骨細胞上的表達，結(jié)果顯

8、示：所有病例無論成骨細胞還是破骨細胞中都未發(fā)現(xiàn)eNOS陽性表達。纖維細胞中也未出現(xiàn)eNOS的陽性表達。只有在兩種疾病中病變區(qū)內(nèi)的血管壁上可見eNOS的陽性表達。②nNoS在OF、FD中的表達 14例OF和20例FD中nNOS在骨母細胞、破骨細胞上的表達，結(jié)果顯示：14例OF中兩例破骨細胞nNOS表達陽性，陽性率為14.3％；全部FD中破骨細胞nNOS均為陰性。一例OF、一例FD中骨母細胞nNOS表達陽性，陽性率分別為7.14％和5％。

9、纖維細胞中未出現(xiàn)nNOS的陽性表達。③iNOS在OF、FD中破骨細胞上的表達14例OF和20例FD，可見iNOS在破骨細胞上存在陽性表達。其中14例OF中破骨細胞9例iNOS表達為陽性，5例為陰性，陽性率為64.3％；20例FD中破骨細胞5例iNOS表達為陽性，15例為陰性，陽性率為25.0％。經(jīng)x2檢驗，iNOS在OF與FD中破骨細胞上的表達有顯著性差異(p<0.05)，在前者上的表達率較高。④iNOS在OF、FD中骨母細胞上的表達1

10、4例oF中，12例可檢出骨母細胞，檢出率為85.7％；20例FD中，只有4例可檢出骨母細胞，檢出率為20％。在可檢出骨母細胞的12例OF病例中有3例iNOS表達陽性，陽性率為25.0％；可檢出骨母細胞的4例FD病例中iNOS表達全部為陽性，陽性率為100.0％。經(jīng)x2檢驗，p<0.05，說明iNOS在0F與FD骨母細胞上的表達具有顯著性差異，在后者上的表達率高。⑤iNOS在OF、FD中纖維母細胞上的表達兩種疾病病變區(qū)內(nèi)可見纖維母細胞分布

11、，iNOS在兩種疾病的纖維母細胞上均有表達，無顯著性差異(p>0.05)，兩者表達的陽性率無本質(zhì)差別。 結(jié)論: ①eNOS缺乏能導(dǎo)致成骨細胞的數(shù)量減少，成骨功能降低及破骨細胞的功能受抑制，其表達缺失與FD與OF的臨床病理特征間有著密切的關(guān)系。 ②iNOS的活性被激活后可導(dǎo)致成骨細胞生長和功能被顯著抑制，其過表達及表達差異的顯著性與兩種疾病的臨床病理特征間有著密切的關(guān)系。 ③三種NOS在人體骨細胞內(nèi)的