IGF-Ⅱ促小鼠成骨樣細(xì)胞增殖及對(duì)細(xì)胞一氧化氮合酶基因表達(dá)的影響.pdf

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文IGFⅡ促小鼠成骨樣細(xì)胞增殖及對(duì)細(xì)胞一氧化氮合酶基因表達(dá)的影響姓名：孫偉蓮申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：陳莉麗2003.5.1浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文中文攮要(induciblenitficoxidesynthase，iNOS)的表達(dá)，使NO水平升高；但抑制大鼠血管平滑肌細(xì)胞和小鼠胰島細(xì)胞iNOS的表達(dá)，結(jié)果使NO水平降低，體現(xiàn)為抗NO細(xì)胞毒性、抗細(xì)胞凋亡作用。然而，有關(guān)IGFⅡ?qū)Τ晒羌?xì)胞NO水平的調(diào)節(jié)作

2、用及其機(jī)制，尚未見(jiàn)國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道。我們研究IGFII對(duì)小鼠成骨細(xì)胞株MC3T3El的增殖、存活效應(yīng)及對(duì)NO水平的調(diào)節(jié)作用，以期為IGFII在阻斷牙槽骨吸收及生物修復(fù)牙槽骨、／中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。廣方目的探討IGFIII對(duì)小鼠成骨細(xì)胞的增殖和存活效應(yīng)、NO水平的調(diào)節(jié)作用、iNOS和內(nèi)皮型NOS(endothelialnitricoxidesynthase，eNOS)mRNA轉(zhuǎn)錄水平的影響，以初步了解IGFⅡ促成骨細(xì)胞增殖的分子機(jī)制。方法

3、選用小鼠成骨細(xì)胞株MC3T3E1為IGF1I效應(yīng)檢測(cè)的細(xì)胞模型。在不同濃度、不同時(shí)間IGF4I作用MC3T3E1細(xì)胞后，用噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測(cè)促細(xì)胞增殖及細(xì)胞活性的效應(yīng)；用酶化學(xué)法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液上清中NO濃度；應(yīng)用半定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reversetranscriptionpolymerasechainreaction，R■PCR)檢測(cè)細(xì)胞謝Os和eNOSmRNA水平。，／結(jié)果L1IGFⅡ?qū)c3T3E1細(xì)胞增殖的濃度及時(shí)

4、問(wèn)效應(yīng)MTr法通過(guò)檢測(cè)oD490吸光值來(lái)反映細(xì)胞增殖程度，OD490吸光值大小與細(xì)胞數(shù)量成良好的正向線性關(guān)系。細(xì)胞培養(yǎng)8h時(shí)，各IGFII組和對(duì)照組細(xì)胞之間的OD490值均無(wú)顯著性差異(，1=O992，P005)。培養(yǎng)24h時(shí)：10ng／mL和100nedmLIGFⅡ組細(xì)胞的OD490值均高于對(duì)照組(q49262，P005；曠76839，P001)，100ngdmLIOFII組細(xì)胞的OD4舶值也明顯較1ng／mL組為高(一2326，PO

5、01)，但1ng／mL／OFH組和對(duì)照組、1ng／mL和10ng／mLIGFⅡ組、10ng／mL和100ng／mLIGFII組之間的OD4∞值無(wú)顯著性差異(，005)。細(xì)胞培養(yǎng)48h時(shí)，10ng／mLIGFⅡ組與對(duì)照組、100ng／mLIGFII組與對(duì)照組、1ng／mL與10ng／mLIGF4I組、10n#mL與100ngtmLIGF一Ⅱ組之間的OD伽值差異均有顯著性(曠84933，204883，55380，119949，P001)，但